中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2009年
6期
737-742
,共6页
史珊珊%胡美钦%戚志平%佘柽柏%刘冬敏%李宝馨%杨宝峰
史珊珊%鬍美欽%慼誌平%佘檉柏%劉鼕敏%李寶馨%楊寶峰
사산산%호미흠%척지평%사정백%류동민%리보형%양보봉
卡维地洛%HERG钾通道%膜片钳技术%Westernblot技术
卡維地洛%HERG鉀通道%膜片鉗技術%Westernblot技術
잡유지락%HERG갑통도%막편겸기술%Westernblot기술
目的 探讨卡维地洛对稳定转染HERG基因的HEK(human embryonic kidney)293细胞上的HERG钾通道的影响.方法 应用全细胞膜片钳技术记录在HEK293细胞上稳定表达的HERG钾通道的电流和动力学曲线(激活、失活、复活和去激活 ),研究不同浓度卡维地洛对HERG电流及动力学的影响;用Western blot技术定量的观察不同浓度卡维地洛对定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道蛋白表达的影响.结果卡维地洛(10、100 nmol*L-1,1、10 μmol*L-1)浓度依赖性的抑制HERG步阶电流(Istep)及其尾电流(Itail).由Hill方程得出IC50为539.6 nmol*L-1,Hillslope为-0.64.1 μmol*L-1卡维地洛作用后瞬时失活、去激活时间常数明显降低(P<0.05,n=10),而激活、失活、复活动力学无明显改变;Western blot检测结果显示卡维地洛组与无加药对照组HERG蛋白的表达无差别.结论卡维地洛通过影响通道的开放状态抑制HERG钾电流,加速瞬时失活和去激活动力学,对HERG蛋白的表达及成熟无影响.
目的 探討卡維地洛對穩定轉染HERG基因的HEK(human embryonic kidney)293細胞上的HERG鉀通道的影響.方法 應用全細胞膜片鉗技術記錄在HEK293細胞上穩定錶達的HERG鉀通道的電流和動力學麯線(激活、失活、複活和去激活 ),研究不同濃度卡維地洛對HERG電流及動力學的影響;用Western blot技術定量的觀察不同濃度卡維地洛對定位于HERG-HEK細胞膜上的HERG鉀通道蛋白錶達的影響.結果卡維地洛(10、100 nmol*L-1,1、10 μmol*L-1)濃度依賴性的抑製HERG步階電流(Istep)及其尾電流(Itail).由Hill方程得齣IC50為539.6 nmol*L-1,Hillslope為-0.64.1 μmol*L-1卡維地洛作用後瞬時失活、去激活時間常數明顯降低(P<0.05,n=10),而激活、失活、複活動力學無明顯改變;Western blot檢測結果顯示卡維地洛組與無加藥對照組HERG蛋白的錶達無差彆.結論卡維地洛通過影響通道的開放狀態抑製HERG鉀電流,加速瞬時失活和去激活動力學,對HERG蛋白的錶達及成熟無影響.
목적 탐토잡유지락대은정전염HERG기인적HEK(human embryonic kidney)293세포상적HERG갑통도적영향.방법 응용전세포막편겸기술기록재HEK293세포상은정표체적HERG갑통도적전류화동역학곡선(격활、실활、복활화거격활 ),연구불동농도잡유지락대HERG전류급동역학적영향;용Western blot기술정량적관찰불동농도잡유지락대정위우HERG-HEK세포막상적HERG갑통도단백표체적영향.결과잡유지락(10、100 nmol*L-1,1、10 μmol*L-1)농도의뢰성적억제HERG보계전류(Istep)급기미전류(Itail).유Hill방정득출IC50위539.6 nmol*L-1,Hillslope위-0.64.1 μmol*L-1잡유지락작용후순시실활、거격활시간상수명현강저(P<0.05,n=10),이격활、실활、복활동역학무명현개변;Western blot검측결과현시잡유지락조여무가약대조조HERG단백적표체무차별.결론잡유지락통과영향통도적개방상태억제HERG갑전류,가속순시실활화거격활동역학,대HERG단백적표체급성숙무영향.
