黑龙江畜牧兽医
黑龍江畜牧獸醫
흑룡강축목수의
HEILONGJIANG JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE AND VETERINARY MEDICINE
2009年
8期
14-17
,共4页
谢体三%农微%张新民%黄雅琼%崔奎青%石德顺
謝體三%農微%張新民%黃雅瓊%崔奎青%石德順
사체삼%농미%장신민%황아경%최규청%석덕순
抑制素α亚基%水牛%原核表达
抑製素α亞基%水牛%原覈錶達
억제소α아기%수우%원핵표체
采用RT-PCR方法从水牛卵巢总RNA中扩增抑制素α亚基基因,并克隆入pMD18-T载体,进行PCR、双酶切及测序鉴定.序列分析结果表明:水牛抑制素α亚基基因编码序列长为1 083 bp,编码360个氨基酸,与牛、人、猪抑制素α亚基基因CDS成熟蛋白氨基酸的同源性分别为96%、80%、87%,表明抑制素α亚基是一组在进化上高度保守的蛋白质.将水牛抑制素α亚基基因CDS克隆到pET-30a表达载体中,转化宿主菌BL21(DE3)进行原核表达.在1 mmol/L IPTG 中,37 ℃诱导表达4 h后抑制素α亚基基因重组蛋白可成功获得表达.将表达产物进行SDS-PAGE分析,结果表达产物主要以包涵体形式存在,分子质量约为40 ku.
採用RT-PCR方法從水牛卵巢總RNA中擴增抑製素α亞基基因,併剋隆入pMD18-T載體,進行PCR、雙酶切及測序鑒定.序列分析結果錶明:水牛抑製素α亞基基因編碼序列長為1 083 bp,編碼360箇氨基痠,與牛、人、豬抑製素α亞基基因CDS成熟蛋白氨基痠的同源性分彆為96%、80%、87%,錶明抑製素α亞基是一組在進化上高度保守的蛋白質.將水牛抑製素α亞基基因CDS剋隆到pET-30a錶達載體中,轉化宿主菌BL21(DE3)進行原覈錶達.在1 mmol/L IPTG 中,37 ℃誘導錶達4 h後抑製素α亞基基因重組蛋白可成功穫得錶達.將錶達產物進行SDS-PAGE分析,結果錶達產物主要以包涵體形式存在,分子質量約為40 ku.
채용RT-PCR방법종수우란소총RNA중확증억제소α아기기인,병극륭입pMD18-T재체,진행PCR、쌍매절급측서감정.서렬분석결과표명:수우억제소α아기기인편마서렬장위1 083 bp,편마360개안기산,여우、인、저억제소α아기기인CDS성숙단백안기산적동원성분별위96%、80%、87%,표명억제소α아기시일조재진화상고도보수적단백질.장수우억제소α아기기인CDS극륭도pET-30a표체재체중,전화숙주균BL21(DE3)진행원핵표체.재1 mmol/L IPTG 중,37 ℃유도표체4 h후억제소α아기기인중조단백가성공획득표체.장표체산물진행SDS-PAGE분석,결과표체산물주요이포함체형식존재,분자질량약위40 ku.
