河南科学
河南科學
하남과학
HENAN SCIENCE
2009年
11期
1377-1381
,共5页
丁博%王磊%谢来峰%樊晋宇%徐存拴
丁博%王磊%謝來峰%樊晉宇%徐存拴
정박%왕뢰%사래봉%번진우%서존전
大鼠%细胞分离和鉴定%库普弗细胞%免疫磁珠%标记蛋白
大鼠%細胞分離和鑒定%庫普弗細胞%免疫磁珠%標記蛋白
대서%세포분리화감정%고보불세포%면역자주%표기단백
按Higgins等方法制作大鼠2,3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60% Percoll梯度离心结合免疫磁珠方法分离库普弗细胞(Kupffer cell,KC),用外胚层发育不良抗原2(ectodermal dysplasia antigen 2,ED2)和溶菌酶(lysozyme,LYZ)的免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的库普弗细胞,用RT-PCR定量库普弗细胞的ED2和LYZ mRNA,用蛋白免疫印迹方法定量库普弗细胞的ED2和LYZ蛋白.初步证实,分离的肝库普弗细胞中ED2和LYZ阳性细胞占96%以上,从PH后各时间点分离的库普弗细胞ED2和LYZ mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进的分离库普弗细胞方法具有收率和纯度高、活性好等优点,值得采用.
按Higgins等方法製作大鼠2,3肝切除(partial hepatectomy,PH)模型,用兩步灌流法分散肝髒細胞,用60% Percoll梯度離心結閤免疫磁珠方法分離庫普弗細胞(Kupffer cell,KC),用外胚層髮育不良抗原2(ectodermal dysplasia antigen 2,ED2)和溶菌酶(lysozyme,LYZ)的免疫組織化學方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝髒細胞及分離的庫普弗細胞,用RT-PCR定量庫普弗細胞的ED2和LYZ mRNA,用蛋白免疫印跡方法定量庫普弗細胞的ED2和LYZ蛋白.初步證實,分離的肝庫普弗細胞中ED2和LYZ暘性細胞佔96%以上,從PH後各時間點分離的庫普弗細胞ED2和LYZ mRNA量穩定,相應的蛋白量亦穩定.錶明改進的分離庫普弗細胞方法具有收率和純度高、活性好等優點,值得採用.
안Higgins등방법제작대서2,3간절제(partial hepatectomy,PH)모형,용량보관류법분산간장세포,용60% Percoll제도리심결합면역자주방법분리고보불세포(Kupffer cell,KC),용외배층발육불량항원2(ectodermal dysplasia antigen 2,ED2)화용균매(lysozyme,LYZ)적면역조직화학방법정성、정위재생간(regenerating liver,RL)、분산적간장세포급분리적고보불세포,용RT-PCR정량고보불세포적ED2화LYZ mRNA,용단백면역인적방법정량고보불세포적ED2화LYZ단백.초보증실,분리적간고보불세포중ED2화LYZ양성세포점96%이상,종PH후각시간점분리적고보불세포ED2화LYZ mRNA량은정,상응적단백량역은정.표명개진적분리고보불세포방법구유수솔화순도고、활성호등우점,치득채용.
