中国胸心血管外科临床杂志
中國胸心血管外科臨床雜誌
중국흉심혈관외과림상잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL THORACIC AND CARDIOVASCULAR SURGERY
2010年
1期
41-45
,共5页
姜辉%王辉山%汪曾炜%朱洪玉%李新民%苑文杰%葛玉光
薑輝%王輝山%汪曾煒%硃洪玉%李新民%苑文傑%葛玉光
강휘%왕휘산%왕증위%주홍옥%리신민%원문걸%갈옥광
骨髓间充质干细胞%人%细胞培养%鉴定%体外
骨髓間充質榦細胞%人%細胞培養%鑒定%體外
골수간충질간세포%인%세포배양%감정%체외
目的 观察体外培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)的形态和生长规律,以证实人MSCs是一种理想的种子细胞,以及为进一步深入研究提供基础理论依据.方法 对人骨髓淋巴细胞分离液采用密度梯度离心法和差异贴壁法进行分离、提纯MSCs.观察原代、传代细胞的结构、生长情况,对第2代MSCs表面抗原进行测定. 结果 MSCs原代培养第14～16 d时细胞融合成单层,传代细胞保持原代细胞的形态特征.超微结构显示:第2代MSCs细胞核形态不规则,部分核可见多个核仁,胞质内细胞器形态分化幼稚.细胞的生长曲线显示:传代第3 d起呈对数生长,第5d达到高峰,10代后无明显克隆出现.P1代克隆形成率为25.83%±2.93%,Ps代为14.67%±1.63%,P10代为4.67%±0.52%.MSCs的表型特征显示细胞均一性较好,MSCs表达CD29,CD44,但不表达CD34,CD45.结论 用淋巴细胞分离液密度梯度离心和贴壁筛选法.可分离、纯化人MSCs,方法简单、经济,易应用;MSCs增殖能力强,可在体外大量扩增,能满足组织工程的要求,是理想的种子细胞之一.
目的 觀察體外培養人骨髓間充質榦細胞(MSCs)的形態和生長規律,以證實人MSCs是一種理想的種子細胞,以及為進一步深入研究提供基礎理論依據.方法 對人骨髓淋巴細胞分離液採用密度梯度離心法和差異貼壁法進行分離、提純MSCs.觀察原代、傳代細胞的結構、生長情況,對第2代MSCs錶麵抗原進行測定. 結果 MSCs原代培養第14～16 d時細胞融閤成單層,傳代細胞保持原代細胞的形態特徵.超微結構顯示:第2代MSCs細胞覈形態不規則,部分覈可見多箇覈仁,胞質內細胞器形態分化幼稚.細胞的生長麯線顯示:傳代第3 d起呈對數生長,第5d達到高峰,10代後無明顯剋隆齣現.P1代剋隆形成率為25.83%±2.93%,Ps代為14.67%±1.63%,P10代為4.67%±0.52%.MSCs的錶型特徵顯示細胞均一性較好,MSCs錶達CD29,CD44,但不錶達CD34,CD45.結論 用淋巴細胞分離液密度梯度離心和貼壁篩選法.可分離、純化人MSCs,方法簡單、經濟,易應用;MSCs增殖能力彊,可在體外大量擴增,能滿足組織工程的要求,是理想的種子細胞之一.
목적 관찰체외배양인골수간충질간세포(MSCs)적형태화생장규률,이증실인MSCs시일충이상적충자세포,이급위진일보심입연구제공기출이론의거.방법 대인골수림파세포분리액채용밀도제도리심법화차이첩벽법진행분리、제순MSCs.관찰원대、전대세포적결구、생장정황,대제2대MSCs표면항원진행측정. 결과 MSCs원대배양제14～16 d시세포융합성단층,전대세포보지원대세포적형태특정.초미결구현시:제2대MSCs세포핵형태불규칙,부분핵가견다개핵인,포질내세포기형태분화유치.세포적생장곡선현시:전대제3 d기정대수생장,제5d체도고봉,10대후무명현극륭출현.P1대극륭형성솔위25.83%±2.93%,Ps대위14.67%±1.63%,P10대위4.67%±0.52%.MSCs적표형특정현시세포균일성교호,MSCs표체CD29,CD44,단불표체CD34,CD45.결론 용림파세포분리액밀도제도리심화첩벽사선법.가분리、순화인MSCs,방법간단、경제,역응용;MSCs증식능력강,가재체외대량확증,능만족조직공정적요구,시이상적충자세포지일.
