协和医学杂志
協和醫學雜誌
협화의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF PEKING UNION MEDICAL COLLEGE HOSPITAL
2012年
1期
102-108
,共7页
师晓华%梁智勇%吴焕文%任新瑜%刘彤华
師曉華%樑智勇%吳煥文%任新瑜%劉彤華
사효화%량지용%오환문%임신유%류동화
RNA干扰%胰腺癌%Panc-1细胞系%基因治疗%蛋白激酶B
RNA榦擾%胰腺癌%Panc-1細胞繫%基因治療%蛋白激酶B
RNA간우%이선암%Panc-1세포계%기인치료%단백격매B
目的 探讨RNA干扰质粒抑制胰腺癌细胞系Panc-1原癌基因AKT2的表达对胰腺癌细胞生长和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 选择胰腺癌细胞系Panc-1,构建特异性抑制AKT2表达的RNA干扰质粒,瞬时和稳定转染胰腺癌细胞,采用MTT法及软琼脂克隆形成实验检测胰腺癌细胞生长能力,Heochst染色及Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡情况,通过Western blot方法检测凋亡蛋白caspase-3表达；并进行裸鼠移植瘤体内转染实验.结果 采用RNA干扰质粒沉默胰腺癌细胞系Panc -1原癌基因AKT2,能够有效抑制胰腺癌细胞Panc-1体外生长能力、促进细胞凋亡,诱导凋亡激酶caspase-3的表达；动物体内实验结果显示,干扰质粒能够有效抑制胰腺癌细胞系Panc-1在动物体内的成瘤能力.结论 RNA干扰质粒抑制原癌基因AKT2表达,可有效抑制胰腺癌细胞生长,促进凋亡,针对原癌基因AKT2的基因治疗对胰腺癌具有重要的潜在应用价值.
目的 探討RNA榦擾質粒抑製胰腺癌細胞繫Panc-1原癌基因AKT2的錶達對胰腺癌細胞生長和凋亡的影響,併初步探討其作用機製.方法 選擇胰腺癌細胞繫Panc-1,構建特異性抑製AKT2錶達的RNA榦擾質粒,瞬時和穩定轉染胰腺癌細胞,採用MTT法及軟瓊脂剋隆形成實驗檢測胰腺癌細胞生長能力,Heochst染色及Annexin V-FITC/PI染色法檢測細胞凋亡情況,通過Western blot方法檢測凋亡蛋白caspase-3錶達；併進行裸鼠移植瘤體內轉染實驗.結果 採用RNA榦擾質粒沉默胰腺癌細胞繫Panc -1原癌基因AKT2,能夠有效抑製胰腺癌細胞Panc-1體外生長能力、促進細胞凋亡,誘導凋亡激酶caspase-3的錶達；動物體內實驗結果顯示,榦擾質粒能夠有效抑製胰腺癌細胞繫Panc-1在動物體內的成瘤能力.結論 RNA榦擾質粒抑製原癌基因AKT2錶達,可有效抑製胰腺癌細胞生長,促進凋亡,針對原癌基因AKT2的基因治療對胰腺癌具有重要的潛在應用價值.
목적 탐토RNA간우질립억제이선암세포계Panc-1원암기인AKT2적표체대이선암세포생장화조망적영향,병초보탐토기작용궤제.방법 선택이선암세포계Panc-1,구건특이성억제AKT2표체적RNA간우질립,순시화은정전염이선암세포,채용MTT법급연경지극륭형성실험검측이선암세포생장능력,Heochst염색급Annexin V-FITC/PI염색법검측세포조망정황,통과Western blot방법검측조망단백caspase-3표체；병진행라서이식류체내전염실험.결과 채용RNA간우질립침묵이선암세포계Panc -1원암기인AKT2,능구유효억제이선암세포Panc-1체외생장능력、촉진세포조망,유도조망격매caspase-3적표체；동물체내실험결과현시,간우질립능구유효억제이선암세포계Panc-1재동물체내적성류능력.결론 RNA간우질립억제원암기인AKT2표체,가유효억제이선암세포생장,촉진조망,침대원암기인AKT2적기인치료대이선암구유중요적잠재응용개치.
