华中农业大学学报
華中農業大學學報
화중농업대학학보
JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
2期
152-158
,共7页
水稻%OsVIP1%RNAi%遗传转化%转基因
水稻%OsVIP1%RNAi%遺傳轉化%轉基因
수도%OsVIP1%RNAi%유전전화%전기인
为进一步阐明农杆菌介导的遗传转化分子机制,进而利用分子生物学方法提高农杆菌转化水稻效率,以水稻品种中花ii为遗传转化受体材料,利用RNAi技术对水稻中拟南芥AtVIP1蛋白的同源蛋白进行了功能研究.通过同源性比对得到水稻中拟南芥AtVIP1蛋白的同源蛋白序列,命名为OsVIP1,构建了该蛋白基因2个片段(R1和R2)的RNAi表达载体pDS1301-2-R1和pDS1301-2-R2,通过农杆菌介导的方法分别转化水稻中花11.对转基因抗性愈伤进行统计,结果表明,由携带pDS1301-2-R1和pDS1301-2-R2载体转化的抗性愈伤的形成受到一定程度抑制.经PCR检测,证明2个片段R1和R2均成功整合到再生水稻植株基因组中；半定量RT-PCR分析显示部分RNAi转基因植株中OsVIP1基因表达被成功抑制.
為進一步闡明農桿菌介導的遺傳轉化分子機製,進而利用分子生物學方法提高農桿菌轉化水稻效率,以水稻品種中花ii為遺傳轉化受體材料,利用RNAi技術對水稻中擬南芥AtVIP1蛋白的同源蛋白進行瞭功能研究.通過同源性比對得到水稻中擬南芥AtVIP1蛋白的同源蛋白序列,命名為OsVIP1,構建瞭該蛋白基因2箇片段(R1和R2)的RNAi錶達載體pDS1301-2-R1和pDS1301-2-R2,通過農桿菌介導的方法分彆轉化水稻中花11.對轉基因抗性愈傷進行統計,結果錶明,由攜帶pDS1301-2-R1和pDS1301-2-R2載體轉化的抗性愈傷的形成受到一定程度抑製.經PCR檢測,證明2箇片段R1和R2均成功整閤到再生水稻植株基因組中；半定量RT-PCR分析顯示部分RNAi轉基因植株中OsVIP1基因錶達被成功抑製.
위진일보천명농간균개도적유전전화분자궤제,진이이용분자생물학방법제고농간균전화수도효솔,이수도품충중화ii위유전전화수체재료,이용RNAi기술대수도중의남개AtVIP1단백적동원단백진행료공능연구.통과동원성비대득도수도중의남개AtVIP1단백적동원단백서렬,명명위OsVIP1,구건료해단백기인2개편단(R1화R2)적RNAi표체재체pDS1301-2-R1화pDS1301-2-R2,통과농간균개도적방법분별전화수도중화11.대전기인항성유상진행통계,결과표명,유휴대pDS1301-2-R1화pDS1301-2-R2재체전화적항성유상적형성수도일정정도억제.경PCR검측,증명2개편단R1화R2균성공정합도재생수도식주기인조중；반정량RT-PCR분석현시부분RNAi전기인식주중OsVIP1기인표체피성공억제.
