南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2012年
1期
71-74
,共4页
蒋朴%徐颖%胡良安%刘杨%邓世雄
蔣樸%徐穎%鬍良安%劉楊%鄧世雄
장박%서영%호량안%류양%산세웅
N9小胶质细胞%常压高浓度氧%Toll样受体4%活性氧%促炎症因子%凋亡
N9小膠質細胞%常壓高濃度氧%Toll樣受體4%活性氧%促炎癥因子%凋亡
N9소효질세포%상압고농도양%Toll양수체4%활성양%촉염증인자%조망
目的 探讨常压高浓度氧暴露对N9小胶质细胞功能的影响.方法 体外培养N9小胶质细胞,分别在900 ml/L高浓度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h后(1)流式细胞术检测细胞存活率及凋亡率；(2)DCFH-DA荧光探针检测活性氧(ROS)含量的变化；(3)RT-PCR检测Toll样受体4(TLR4)mRNA表达变化；(4)ELISA检测N9细胞培养上清中IL-1β和TNF-α的含量；(5)免疫荧光化学染色检测TLR4蛋白的表达变化.结果 流式细胞术结果示,细胞凋亡率在高氧暴露12h后明显高于空气对照组(P＜0.05),16h达高峰(P＜0.01)；高氧暴露2h后,细胞内ROS含量明显增加,呈一定时间依赖性；TLR4 mRNA及蛋白表达水平明显高于空气对照组(P＜0.05)；高氧暴露后细胞上清中TNF-α及IL-1β含量随暴露时间延长而增加,均在6h开始升高,12～16 h达高峰(P＜0.05),IL-1β增高较TNF-α更为明显.结论 高氧暴露后N9小胶质细胞TLR4通路激活,产生大量神经毒性因子(ROS、IL-1β及TNF-α),细胞凋亡增加.
目的 探討常壓高濃度氧暴露對N9小膠質細胞功能的影響.方法 體外培養N9小膠質細胞,分彆在900 ml/L高濃度氧中暴露2、6、12、16、24、48 h後(1)流式細胞術檢測細胞存活率及凋亡率；(2)DCFH-DA熒光探針檢測活性氧(ROS)含量的變化；(3)RT-PCR檢測Toll樣受體4(TLR4)mRNA錶達變化；(4)ELISA檢測N9細胞培養上清中IL-1β和TNF-α的含量；(5)免疫熒光化學染色檢測TLR4蛋白的錶達變化.結果 流式細胞術結果示,細胞凋亡率在高氧暴露12h後明顯高于空氣對照組(P＜0.05),16h達高峰(P＜0.01)；高氧暴露2h後,細胞內ROS含量明顯增加,呈一定時間依賴性；TLR4 mRNA及蛋白錶達水平明顯高于空氣對照組(P＜0.05)；高氧暴露後細胞上清中TNF-α及IL-1β含量隨暴露時間延長而增加,均在6h開始升高,12～16 h達高峰(P＜0.05),IL-1β增高較TNF-α更為明顯.結論 高氧暴露後N9小膠質細胞TLR4通路激活,產生大量神經毒性因子(ROS、IL-1β及TNF-α),細胞凋亡增加.
목적 탐토상압고농도양폭로대N9소효질세포공능적영향.방법 체외배양N9소효질세포,분별재900 ml/L고농도양중폭로2、6、12、16、24、48 h후(1)류식세포술검측세포존활솔급조망솔；(2)DCFH-DA형광탐침검측활성양(ROS)함량적변화；(3)RT-PCR검측Toll양수체4(TLR4)mRNA표체변화；(4)ELISA검측N9세포배양상청중IL-1β화TNF-α적함량；(5)면역형광화학염색검측TLR4단백적표체변화.결과 류식세포술결과시,세포조망솔재고양폭로12h후명현고우공기대조조(P＜0.05),16h체고봉(P＜0.01)；고양폭로2h후,세포내ROS함량명현증가,정일정시간의뢰성；TLR4 mRNA급단백표체수평명현고우공기대조조(P＜0.05)；고양폭로후세포상청중TNF-α급IL-1β함량수폭로시간연장이증가,균재6h개시승고,12～16 h체고봉(P＜0.05),IL-1β증고교TNF-α경위명현.결론 고양폭로후N9소효질세포TLR4통로격활,산생대량신경독성인자(ROS、IL-1β급TNF-α),세포조망증가.
