生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
2期
245-247
,共3页
曾威%赵昕梅%薛佩%陈春妍%师彗云%袁红雨
曾威%趙昕梅%薛珮%陳春妍%師彗雲%袁紅雨
증위%조흔매%설패%진춘연%사혜운%원홍우
茶树%α-tubulin基因%实时荧光定量PCR
茶樹%α-tubulin基因%實時熒光定量PCR
다수%α-tubulin기인%실시형광정량PCR
目的:建立茶树α-tubulin基因实时荧光定量RT-PCR方法.方法:根据GenBank中茶树α-tubulin基因保守区域设计一对特异性引物,将PCR扩增得到的α-tubulin基因克隆到pTG 19-T载体上,构建的重组质粒标准品经1/10梯度稀释后,用SYBR Green Ⅰ染料法绘制标准曲线,并进行融解曲线分析.结果:标准曲线Ct值检测范围为14.56~27.09,相关系数为0.991,溶解曲线分析显示产物为特异的单峰,其Tm值为81±0.3℃.结论:建立了茶树α-tu-bulin基因实时荧光定量RT-PCR法,为以α-tubulin作为茶树内参基因进行功能基因表达差异研究奠定了基础.
目的:建立茶樹α-tubulin基因實時熒光定量RT-PCR方法.方法:根據GenBank中茶樹α-tubulin基因保守區域設計一對特異性引物,將PCR擴增得到的α-tubulin基因剋隆到pTG 19-T載體上,構建的重組質粒標準品經1/10梯度稀釋後,用SYBR Green Ⅰ染料法繪製標準麯線,併進行融解麯線分析.結果:標準麯線Ct值檢測範圍為14.56~27.09,相關繫數為0.991,溶解麯線分析顯示產物為特異的單峰,其Tm值為81±0.3℃.結論:建立瞭茶樹α-tu-bulin基因實時熒光定量RT-PCR法,為以α-tubulin作為茶樹內參基因進行功能基因錶達差異研究奠定瞭基礎.
목적:건립다수α-tubulin기인실시형광정량RT-PCR방법.방법:근거GenBank중다수α-tubulin기인보수구역설계일대특이성인물,장PCR확증득도적α-tubulin기인극륭도pTG 19-T재체상,구건적중조질립표준품경1/10제도희석후,용SYBR Green Ⅰ염료법회제표준곡선,병진행융해곡선분석.결과:표준곡선Ct치검측범위위14.56~27.09,상관계수위0.991,용해곡선분석현시산물위특이적단봉,기Tm치위81±0.3℃.결론:건립료다수α-tu-bulin기인실시형광정량RT-PCR법,위이α-tubulin작위다수내삼기인진행공능기인표체차이연구전정료기출.