中华肾脏病杂志
中華腎髒病雜誌
중화신장병잡지
2003年
6期
402-405
,共4页
李娅%陈楠%王伟铭%张群业%黄秋花
李婭%陳楠%王偉銘%張群業%黃鞦花
리아%진남%왕위명%장군업%황추화
蛋白质组%双向电泳%人肾小管上皮细胞%图像分析
蛋白質組%雙嚮電泳%人腎小管上皮細胞%圖像分析
단백질조%쌍향전영%인신소관상피세포%도상분석
目的双向电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2DGE)技术是蛋白质组研究中最为重要的蛋白质分离方法.建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组分析所需的固相pH梯度等电聚焦双向电泳及相关技术.方法由于不同的细胞系特殊性,样品处理亦不同,因此以人肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,对样品液组成、样品处理、上样方式、上样量、IPG胶条和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法等相关技术进行了研究和条件优化后,以固相pH梯度等电聚焦为第一向和SDS均一胶(T=12.5%)的水平电泳为第二向,研究人肾小管上皮细胞蛋白质组.结果成功地得到了人肾小管上皮细胞双向电泳图谱,并通过ImageMaster 2D Elite 3.01软件进行图像分析,输出初步的检测结果.结论建立蛋白质组研究的技术平台,为从更高的水平来寻找肾脏疾病的功能蛋白和特异性蛋白,阐明肾脏疾病发生发展的网络机制等后续研究工作奠定基础.
目的雙嚮電泳(two-dimensional gel electrophoresis,2DGE)技術是蛋白質組研究中最為重要的蛋白質分離方法.建立併優化人腎小管上皮細胞蛋白質組分析所需的固相pH梯度等電聚焦雙嚮電泳及相關技術.方法由于不同的細胞繫特殊性,樣品處理亦不同,因此以人腎小管上皮細胞HK-2為研究對象,對樣品液組成、樣品處理、上樣方式、上樣量、IPG膠條和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳染色方法等相關技術進行瞭研究和條件優化後,以固相pH梯度等電聚焦為第一嚮和SDS均一膠(T=12.5%)的水平電泳為第二嚮,研究人腎小管上皮細胞蛋白質組.結果成功地得到瞭人腎小管上皮細胞雙嚮電泳圖譜,併通過ImageMaster 2D Elite 3.01軟件進行圖像分析,輸齣初步的檢測結果.結論建立蛋白質組研究的技術平檯,為從更高的水平來尋找腎髒疾病的功能蛋白和特異性蛋白,闡明腎髒疾病髮生髮展的網絡機製等後續研究工作奠定基礎.
목적쌍향전영(two-dimensional gel electrophoresis,2DGE)기술시단백질조연구중최위중요적단백질분리방법.건립병우화인신소관상피세포단백질조분석소수적고상pH제도등전취초쌍향전영급상관기술.방법유우불동적세포계특수성,양품처리역불동,인차이인신소관상피세포HK-2위연구대상,대양품액조성、양품처리、상양방식、상양량、IPG효조화SDS-취병희선알응효전영염색방법등상관기술진행료연구화조건우화후,이고상pH제도등전취초위제일향화SDS균일효(T=12.5%)적수평전영위제이향,연구인신소관상피세포단백질조.결과성공지득도료인신소관상피세포쌍향전영도보,병통과ImageMaster 2D Elite 3.01연건진행도상분석,수출초보적검측결과.결론건립단백질조연구적기술평태,위종경고적수평래심조신장질병적공능단백화특이성단백,천명신장질병발생발전적망락궤제등후속연구공작전정기출.
