四川医学
四川醫學
사천의학
SICHUAN MEDICAL JOURNAL
2010年
5期
564-566
,共3页
结核分支杆菌%rpoB基因%利福平%表达载体
結覈分支桿菌%rpoB基因%利福平%錶達載體
결핵분지간균%rpoB기인%리복평%표체재체
目的 构建结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体.方法 PCR技术扩增获得rpoB基因,连接入pBluescript Ⅱ SK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法 将rpoB基因定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-rpoB,将pQE-Tri-rpoB转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染P815细胞后,以RT-PCR方法 检测mRNA表达.结果 构建了重组质粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR结果 证明rpoB可在P815细胞中转录.结论 成功构建了结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体,rpoB基因可以在P815细胞中表达.
目的 構建結覈分支桿菌耐利福平相關基因rpoB真覈錶達栽體.方法 PCR技術擴增穫得rpoB基因,連接入pBluescript Ⅱ SK剋隆載體上,將重組質粒轉化入大腸桿菌DH5α內併提取質粒,酶切與DNA測序鑒定準確,再用雙酶切方法 將rpoB基因定嚮連接到真覈錶達載體pQE-Trisystem中,構成pQE-Tri-rpoB,將pQE-Tri-rpoB轉化入大腸桿菌DH5α內併提取質粒,雙酶切鑒定、DNA測序鑒定準確,脂質體轉染P815細胞後,以RT-PCR方法 檢測mRNA錶達.結果 構建瞭重組質粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR結果 證明rpoB可在P815細胞中轉錄.結論 成功構建瞭結覈分支桿菌耐利福平相關基因rpoB真覈錶達栽體,rpoB基因可以在P815細胞中錶達.
목적 구건결핵분지간균내리복평상관기인rpoB진핵표체재체.방법 PCR기술확증획득rpoB기인,련접입pBluescript Ⅱ SK극륭재체상,장중조질립전화입대장간균DH5α내병제취질립,매절여DNA측서감정준학,재용쌍매절방법 장rpoB기인정향련접도진핵표체재체pQE-Trisystem중,구성pQE-Tri-rpoB,장pQE-Tri-rpoB전화입대장간균DH5α내병제취질립,쌍매절감정、DNA측서감정준학,지질체전염P815세포후,이RT-PCR방법 검측mRNA표체.결과 구건료중조질립pQE-Tri-rpoB,RT-PCR결과 증명rpoB가재P815세포중전록.결론 성공구건료결핵분지간균내리복평상관기인rpoB진핵표체재체,rpoB기인가이재P815세포중표체.
