浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2012年
3期
388-391
,共4页
季权安%刘燕%肖琛闻%韦强%霍翠梅%鲍国连
季權安%劉燕%肖琛聞%韋彊%霍翠梅%鮑國連
계권안%류연%초침문%위강%곽취매%포국련
菌落PCR%常规PCR%鸭疫里默氏杆菌%OMPA基因
菌落PCR%常規PCR%鴨疫裏默氏桿菌%OMPA基因
균락PCR%상규PCR%압역리묵씨간균%OMPA기인
鸭疫里默氏杆菌病对养鸭业危害严重,传统及常规检测方法均有不足,因此有必要建立起一种更加快速简捷、敏感实用的菌落PCR法.根据GenBank公布的鸭疫里默氏杆菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守区设计特异性引物,直接挑取单菌落作为模板,从分离鉴定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株参考菌株中均能扩增出大小为670bp的特异性核酸片段,而对照的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性；将培养菌用TE作10倍梯度稀释,最低检出限量为80个鸭疫里默氏杆菌；建立的菌落PCR与常规PCR法比较,两种方法均能扩增出相同的特异性条带.结果表明,菌落PCR法具有较好的特异性和敏感性,与常规PCR法结果完全一致,且更加快速简捷,在临床应用上具有更好的实用价值.
鴨疫裏默氏桿菌病對養鴨業危害嚴重,傳統及常規檢測方法均有不足,因此有必要建立起一種更加快速簡捷、敏感實用的菌落PCR法.根據GenBank公佈的鴨疫裏默氏桿菌ATCC株OMPA基因序列,在基因保守區設計特異性引物,直接挑取單菌落作為模闆,從分離鑒定的1,2,10,11型15株菌及1,2,10,11型4株參攷菌株中均能擴增齣大小為670bp的特異性覈痠片段,而對照的大腸桿菌、多殺性巴氏桿菌的擴增結果均為陰性；將培養菌用TE作10倍梯度稀釋,最低檢齣限量為80箇鴨疫裏默氏桿菌；建立的菌落PCR與常規PCR法比較,兩種方法均能擴增齣相同的特異性條帶.結果錶明,菌落PCR法具有較好的特異性和敏感性,與常規PCR法結果完全一緻,且更加快速簡捷,在臨床應用上具有更好的實用價值.
압역리묵씨간균병대양압업위해엄중,전통급상규검측방법균유불족,인차유필요건립기일충경가쾌속간첩、민감실용적균락PCR법.근거GenBank공포적압역리묵씨간균ATCC주OMPA기인서렬,재기인보수구설계특이성인물,직접도취단균락작위모판,종분리감정적1,2,10,11형15주균급1,2,10,11형4주삼고균주중균능확증출대소위670bp적특이성핵산편단,이대조적대장간균、다살성파씨간균적확증결과균위음성；장배양균용TE작10배제도희석,최저검출한량위80개압역리묵씨간균；건립적균락PCR여상규PCR법비교,량충방법균능확증출상동적특이성조대.결과표명,균락PCR법구유교호적특이성화민감성,여상규PCR법결과완전일치,차경가쾌속간첩,재림상응용상구유경호적실용개치.
