CAJ | 학술논문

目的:观察沉寂信息调节因子2激活剂-白藜芦醇干预对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及沉寂信息调节因子2表达的影响.方法:实验于2005-03/10在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成.选用雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为3组,即假手术组、缺血再灌注组和白藜芦醇组,每组10只.白藜芦醇组和缺血再灌注组大鼠结扎冠状动脉左前降支制备心肌缺血再灌注模型,30 min后松开扎线,再灌注2 h.假手术组只穿线不结扎.假手术组及缺血再灌注组给予二甲基亚砜-质量浓度为0.009的生理盐水1 mL/kg,白藜芦醇组给予白藜芦醇10mg/kg,分别于缺血前15 min及再灌注前1 min以1 mL/kg舌下静脉给药.实验结束取出心脏,应用免疫组织化学方法检测沉寂信息调节因子2同源物SIRT1及半胱氨酸蛋白酶3蛋白的表达.以背景灰度值进行标准校正,计算半胱氨酸蛋白酶3表达的相对量,其灰度值愈大则阳性强度愈大.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡情况,凋亡指数=(视野内凋亡细胞个数/视野内所有心肌细胞个数)×100%.结果:30只大鼠全部进入结果分析,每组10只,无脱失.①白藜芦醇组大鼠心肌细胞的SIRT1阳性细胞率显著高于缺血再灌注组(P=0.008),但低于假手术组(P=0.040).②白藜芦醇组大鼠心肌细胞的凋亡指数显著低于缺血再灌注组(P=0.000),而缺血再灌注组则显著高于假手术组(P=0.000).③白藜芦醇组灰度值为27.40±1.87;而缺血再灌注组灰度值为34.69±1.71,着色强度显著高于白藜芦醇组(t=9.098,P=0.000).结论:白藜芦醇可抑制缺血再灌注后心肌细胞凋亡,可能是通过增加沉寂信息调节因子2表达,抑制半胱氨酸蛋白酶3活性而发挥作用.
목적:관찰침적신식조절인자2격활제-백려호순간예대대서결혈재관주심기세포조망급침적신식조절인자2표체적영향.방법:실험우2005-03/10재산두대학의학원세포쇠로실험실완성.선용웅성SD대서30지,안수궤수자표법분위3조,즉가수술조、결혈재관주조화백려호순조,매조10지.백려호순조화결혈재관주조대서결찰관상동맥좌전강지제비심기결혈재관주모형,30 min후송개찰선,재관주2 h.가수술조지천선불결찰.가수술조급결혈재관주조급여이갑기아풍-질량농도위0.009적생리염수1 mL/kg,백려호순조급여백려호순10mg/kg,분별우결혈전15 min급재관주전1 min이1 mL/kg설하정맥급약.실험결속취출심장,응용면역조직화학방법검측침적신식조절인자2동원물SIRT1급반광안산단백매3단백적표체.이배경회도치진행표준교정,계산반광안산단백매3표체적상대량,기회도치유대칙양성강도유대.채용말단탈양핵감산전이매개도적dUTP결구말단표기법검측심기세포조망정황,조망지수=(시야내조망세포개수/시야내소유심기세포개수)×100%.결과:30지대서전부진입결과분석,매조10지,무탈실.①백려호순조대서심기세포적SIRT1양성세포솔현저고우결혈재관주조(P=0.008),단저우가수술조(P=0.040).②백려호순조대서심기세포적조망지수현저저우결혈재관주조(P=0.000),이결혈재관주조칙현저고우가수술조(P=0.000).③백려호순조회도치위27.40±1.87;이결혈재관주조회도치위34.69±1.71,착색강도현저고우백려호순조(t=9.098,P=0.000).결론:백려호순가억제결혈재관주후심기세포조망,가능시통과증가침적신식조절인자2표체,억제반광안산단백매3활성이발휘작용.