CAJ | 학술논문

目的:研究短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)构建的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16 E7siRNA表达载体转染宫颈癌细胞株CaSki细胞后,在体内外对CaSki细胞E 7基因的抑制作用.方法:利用脂质体将构建有HPV16 E7特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的表达载体P1、P2、P3转染CaSki细胞,以实时荧光定量RTPCR及流式细胞仪检测不同时间点E7 mRNA和蛋白的变化,并将载体P1转染后的细胞接种到裸鼠皮下,4周后观察裸鼠体内皮下移植瘤体积和质量的差异,并用免疫组化检测瘤体组织中E7蛋白的表达变化.结果:表达载体P1、P2、P3均能抑制CaSki细胞E7 mRNA和蛋白的表达.其中载体P1抑制作用最强,在抗性克隆形成后1周,对E7 mRNA和蛋白的抑制率分别为92.86%、84.21%;在抗性克隆形成后4周,抑制率仍分别为68.95%、62.50%.在接种后4周载体P1组裸鼠体内皮下移植瘤的体积和重量明显小于空载体组和对照组,同时E7蛋白的表达也被有效抑制,抑制率为74.75%.结论:构建有shRNA的E7 siRNA表达载体在体内外可明显抑制E7基因的表达.
목적:연구단발협상RNA(short hairpin RNA,shRNA)구건적인유두류병독(human papillomavirus,HPV)16 E7siRNA표체재체전염궁경암세포주CaSki세포후,재체내외대CaSki세포E 7기인적억제작용.방법:이용지질체장구건유HPV16 E7특이성소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)적표체재체P1、P2、P3전염CaSki세포,이실시형광정량RTPCR급류식세포의검측불동시간점E7 mRNA화단백적변화,병장재체P1전염후적세포접충도라서피하,4주후관찰라서체내피하이식류체적화질량적차이,병용면역조화검측류체조직중E7단백적표체변화.결과:표체재체P1、P2、P3균능억제CaSki세포E7 mRNA화단백적표체.기중재체P1억제작용최강,재항성극륭형성후1주,대E7 mRNA화단백적억제솔분별위92.86%、84.21%;재항성극륭형성후4주,억제솔잉분별위68.95%、62.50%.재접충후4주재체P1조라서체내피하이식류적체적화중량명현소우공재체조화대조조,동시E7단백적표체야피유효억제,억제솔위74.75%.결론:구건유shRNA적E7 siRNA표체재체재체내외가명현억제E7기인적표체.