微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2007年
6期
1154-1157
,共4页
陈金卿%江贤章%刘丽霞%黄建忠
陳金卿%江賢章%劉麗霞%黃建忠
진금경%강현장%류려하%황건충
海洋破囊壶菌FJN-10%二十二碳六烯酸%△4-脂肪酸脱饱和酶%酿酒酵母
海洋破囊壺菌FJN-10%二十二碳六烯痠%△4-脂肪痠脫飽和酶%釀酒酵母
해양파낭호균FJN-10%이십이탄륙희산%△4-지방산탈포화매%양주효모
以质粒pGEM-TFAD4为模板,扩增获得1.6 kb的△4-脂肪酸脱饱和酶基因(FAD4).将FAD4酶切后连接到Hond Ⅲ/XbaⅠ处理过的pYES2.0载体,构建重组表达质粒pYFAD4.转化酿酒酵母缺陷型菌INVScl,通过SC-U选择性培养基筛选阳性克隆子.添加外源脂肪酸C22:5底物,半乳糖诱导表达.气相色谱分析表明阳性克隆子总脂肪酸中出现了二十二碳六烯酸C22:6(占酵母总脂肪含量的41.13%),△4-脂肪酸脱饱和酶基因在酿酒酵母中得到了表达.
以質粒pGEM-TFAD4為模闆,擴增穫得1.6 kb的△4-脂肪痠脫飽和酶基因(FAD4).將FAD4酶切後連接到Hond Ⅲ/XbaⅠ處理過的pYES2.0載體,構建重組錶達質粒pYFAD4.轉化釀酒酵母缺陷型菌INVScl,通過SC-U選擇性培養基篩選暘性剋隆子.添加外源脂肪痠C22:5底物,半乳糖誘導錶達.氣相色譜分析錶明暘性剋隆子總脂肪痠中齣現瞭二十二碳六烯痠C22:6(佔酵母總脂肪含量的41.13%),△4-脂肪痠脫飽和酶基因在釀酒酵母中得到瞭錶達.
이질립pGEM-TFAD4위모판,확증획득1.6 kb적△4-지방산탈포화매기인(FAD4).장FAD4매절후련접도Hond Ⅲ/XbaⅠ처리과적pYES2.0재체,구건중조표체질립pYFAD4.전화양주효모결함형균INVScl,통과SC-U선택성배양기사선양성극륭자.첨가외원지방산C22:5저물,반유당유도표체.기상색보분석표명양성극륭자총지방산중출현료이십이탄륙희산C22:6(점효모총지방함량적41.13%),△4-지방산탈포화매기인재양주효모중득도료표체.
