解剖科学进展
解剖科學進展
해부과학진전
PROGRESS OF ANATOMICAL SCIENCES
2009年
2期
183-187,191
,共6页
赵晓云%李波%曹立业%方文刚%朱莉%陈誉华
趙曉雲%李波%曹立業%方文剛%硃莉%陳譽華
조효운%리파%조립업%방문강%주리%진예화
小细胞肺癌细胞%人脑微血管内皮细胞%共培养%紧密连接
小細胞肺癌細胞%人腦微血管內皮細胞%共培養%緊密連接
소세포폐암세포%인뇌미혈관내피세포%공배양%긴밀련접
目的 小细胞肺癌易发牛脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用.方法 应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移.结果 小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0 h到12 h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8 h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移.结论 小细胞肺痛细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移.
目的 小細胞肺癌易髮牛腦轉移,但其機製尚不完全清楚,本文探討小細胞肺癌細胞對人腦微血管內皮細胞單層細胞間緊密連接開放的作用.方法 應用免疫熒光技術觀察人腦微血管內皮細胞間緊密連接結構改變;應用Western blot技術分析小細胞肺癌細胞與微血管內皮細胞單層共培養時緊密連接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在內皮細胞緊密連接處的分佈情況;應用跨內皮遷移實驗及辣根過氧化物酶滲漏實驗分析小細胞肺癌細胞與內皮細胞單層共培養後其跨內皮細胞單層的遷移能力和內皮單層滲透性的改變;利用ROCK特異性抑製劑Y27632,分析Rho/ROCK信號通路是否參與小細胞肺癌細胞跨內皮單層遷移.結果 小細胞肺癌細胞能夠通過人腦微血管內皮細胞單層遷移,在0 h到12 h之間隨培養時間的延長小細胞肺癌細胞的遷移率逐漸增加;共培養8 h時人腦微血管內皮細胞緊密連接處緊密連接結構蛋(ZO-1和occludin)錶達減少,通透性明顯增加;ROCK特異性抑製劑Y27632能夠阻斷小細胞肺癌細胞引起的內皮細胞間緊密連接處緊密連接結構蛋白ZO-1和occludin錶達減少、內皮單層通透性的增加及小細胞肺癌細胞跨內皮單層遷移.結論 小細胞肺痛細胞與人腦微血管內皮細胞單層共培養誘髮人腦微血管內皮細胞間緊密連接的開放,利于小細胞肺癌細胞的跨內皮單層遷移.
목적 소세포폐암역발우뇌전이,단기궤제상불완전청초,본문탐토소세포폐암세포대인뇌미혈관내피세포단층세포간긴밀련접개방적작용.방법 응용면역형광기술관찰인뇌미혈관내피세포간긴밀련접결구개변;응용Western blot기술분석소세포폐암세포여미혈관내피세포단층공배양시긴밀련접단백occludin적가용성편단화불가용성편단재내피세포긴밀련접처적분포정황;응용과내피천이실험급랄근과양화물매삼루실험분석소세포폐암세포여내피세포단층공배양후기과내피세포단층적천이능력화내피단층삼투성적개변;이용ROCK특이성억제제Y27632,분석Rho/ROCK신호통로시부삼여소세포폐암세포과내피단층천이.결과 소세포폐암세포능구통과인뇌미혈관내피세포단층천이,재0 h도12 h지간수배양시간적연장소세포폐암세포적천이솔축점증가;공배양8 h시인뇌미혈관내피세포긴밀련접처긴밀련접결구단(ZO-1화occludin)표체감소,통투성명현증가;ROCK특이성억제제Y27632능구조단소세포폐암세포인기적내피세포간긴밀련접처긴밀련접결구단백ZO-1화occludin표체감소、내피단층통투성적증가급소세포폐암세포과내피단층천이.결론 소세포폐통세포여인뇌미혈관내피세포단층공배양유발인뇌미혈관내피세포간긴밀련접적개방,리우소세포폐암세포적과내피단층천이.