草食家畜
草食傢畜
초식가축
GRASS-FEEDING LIVESTOCK
2010年
1期
67-70
,共4页
徐志光%许礼义%呼西旦%宋振忠%徐敏
徐誌光%許禮義%呼西旦%宋振忠%徐敏
서지광%허례의%호서단%송진충%서민
牛分枝杆菌%ESAT-6%表达%纯化
牛分枝桿菌%ESAT-6%錶達%純化
우분지간균%ESAT-6%표체%순화
构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白.方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)polys菌体,经IPTG诱导表达蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白.结果:所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致.经SDS-PAGE分析和Westem-blot鉴定均发现在6kDa处有特异性蛋白条带.纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致.结论:成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白.
構建牛結覈分枝桿菌ESAT-6基因的原覈錶達載體,誘導錶達、純化併初步鑒定該蛋白.方法:以牛型分枝桿菌基因組DNA為模闆,PCR方法擴增ESAT-6基因,產物通過雙酶切剋隆入pET-22b(+)質粒,經PCR、酶切、測序等方法鑒定後,轉入大腸桿菌BL21(DE3)polys菌體,經IPTG誘導錶達蛋白;利用Western-blot鑒定重組蛋白後,純化目的蛋白.結果:所穫得ESAT-6基因序列與GenBank公佈的完全一緻.經SDS-PAGE分析和Westem-blot鑒定均髮現在6kDa處有特異性蛋白條帶.純化的蛋白的大小與蛋白質分子量標準比較一緻.結論:成功錶達純化併鑒定構建瞭ESAT-6融閤蛋白.
구건우결핵분지간균ESAT-6기인적원핵표체재체,유도표체、순화병초보감정해단백.방법:이우형분지간균기인조DNA위모판,PCR방법확증ESAT-6기인,산물통과쌍매절극륭입pET-22b(+)질립,경PCR、매절、측서등방법감정후,전입대장간균BL21(DE3)polys균체,경IPTG유도표체단백;이용Western-blot감정중조단백후,순화목적단백.결과:소획득ESAT-6기인서렬여GenBank공포적완전일치.경SDS-PAGE분석화Westem-blot감정균발현재6kDa처유특이성단백조대.순화적단백적대소여단백질분자량표준비교일치.결론:성공표체순화병감정구건료ESAT-6융합단백.
