中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2011年
14期
2495-2499
,共5页
宋丽华%王庸晋%王金胜%黄燕%武翠玲%石变华
宋麗華%王庸晉%王金勝%黃燕%武翠玲%石變華
송려화%왕용진%왕금성%황연%무취령%석변화
骨髓间充质干细胞%白细胞介素6%分化%肝细胞%干细胞培养与分化
骨髓間充質榦細胞%白細胞介素6%分化%肝細胞%榦細胞培養與分化
골수간충질간세포%백세포개소6%분화%간세포%간세포배양여분화
背景:骨髓间充质干细胞是肝细胞的重要肝外来源,在多种细胞因子和生长因子诱导下可分化为肝细胞,从而参与肝功能的修复和重建.目的:观察白细胞介素6是否可诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞定向分化.方法:采用贴壁法分离培养昆明种雄性小鼠骨髓间充质干细胞,在无血清肝细胞培养液HEPATOZYME-SFM中分别加入2.5,5,10,20 μg/L白细胞介素6诱导其向肝样细胞分化;诱导培养0,7,14,21,28 d时取出细胞爬片,细胞免疫组织化学法检测细胞角蛋白18、甲胎蛋白表达情况,过碘酸-Schiff糖原染色检测细胞功能,ELISA和硝酸还原酶法分别检测培养液中白蛋白和一氧化氮水平.结果与结论:当白细胞介素6质量浓度在2.5~10 μg/L范围内,呈浓度依赖性和时间依赖性增加细胞角蛋白18、糖原表达率及细胞培养液中白蛋白水平;甲胎蛋白表达为先升后降直至21d停止.当白细胞介素6质量浓度增加到20 μg/L时上述诱导作用均不及质量浓度10 μg/L组.只有10 μg/L白细胞介素6组诱导到28 d时细胞培养液中测得微量一氧化氮;提示白细胞介素6可诱导骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化,且在10 μg/L作用最强,质量浓度再增高时诱导作用反而减弱.
揹景:骨髓間充質榦細胞是肝細胞的重要肝外來源,在多種細胞因子和生長因子誘導下可分化為肝細胞,從而參與肝功能的脩複和重建.目的:觀察白細胞介素6是否可誘導骨髓間充質榦細胞嚮肝細胞定嚮分化.方法:採用貼壁法分離培養昆明種雄性小鼠骨髓間充質榦細胞,在無血清肝細胞培養液HEPATOZYME-SFM中分彆加入2.5,5,10,20 μg/L白細胞介素6誘導其嚮肝樣細胞分化;誘導培養0,7,14,21,28 d時取齣細胞爬片,細胞免疫組織化學法檢測細胞角蛋白18、甲胎蛋白錶達情況,過碘痠-Schiff糖原染色檢測細胞功能,ELISA和硝痠還原酶法分彆檢測培養液中白蛋白和一氧化氮水平.結果與結論:噹白細胞介素6質量濃度在2.5~10 μg/L範圍內,呈濃度依賴性和時間依賴性增加細胞角蛋白18、糖原錶達率及細胞培養液中白蛋白水平;甲胎蛋白錶達為先升後降直至21d停止.噹白細胞介素6質量濃度增加到20 μg/L時上述誘導作用均不及質量濃度10 μg/L組.隻有10 μg/L白細胞介素6組誘導到28 d時細胞培養液中測得微量一氧化氮;提示白細胞介素6可誘導骨髓間充質榦細胞嚮肝繫細胞分化,且在10 μg/L作用最彊,質量濃度再增高時誘導作用反而減弱.
배경:골수간충질간세포시간세포적중요간외래원,재다충세포인자화생장인자유도하가분화위간세포,종이삼여간공능적수복화중건.목적:관찰백세포개소6시부가유도골수간충질간세포향간세포정향분화.방법:채용첩벽법분리배양곤명충웅성소서골수간충질간세포,재무혈청간세포배양액HEPATOZYME-SFM중분별가입2.5,5,10,20 μg/L백세포개소6유도기향간양세포분화;유도배양0,7,14,21,28 d시취출세포파편,세포면역조직화학법검측세포각단백18、갑태단백표체정황,과전산-Schiff당원염색검측세포공능,ELISA화초산환원매법분별검측배양액중백단백화일양화담수평.결과여결론:당백세포개소6질량농도재2.5~10 μg/L범위내,정농도의뢰성화시간의뢰성증가세포각단백18、당원표체솔급세포배양액중백단백수평;갑태단백표체위선승후강직지21d정지.당백세포개소6질량농도증가도20 μg/L시상술유도작용균불급질량농도10 μg/L조.지유10 μg/L백세포개소6조유도도28 d시세포배양액중측득미량일양화담;제시백세포개소6가유도골수간충질간세포향간계세포분화,차재10 μg/L작용최강,질량농도재증고시유도작용반이감약.
