医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2011年
5期
429-432
,共4页
张敏%周英妹%龚帧%陈惠%熊建军
張敏%週英妹%龔幀%陳惠%熊建軍
장민%주영매%공정%진혜%웅건군
sp1基因%USP22基因%RT-PCR%启动子%萤光素酶
sp1基因%USP22基因%RT-PCR%啟動子%螢光素酶
sp1기인%USP22기인%RT-PCR%계동자%형광소매
目的 克隆人sp1基因,构建真核表细胞达载体pVAX-Sp1,研究其对USP22基因转录活性的影响.方法 Trizol试剂快速提取人肝癌细胞株HepG2总RNA,经RT-PCR扩增Sp1基因序列,与pVAX1真核表达载体连接;测序、酶切鉴定重组载体;pVAX1-Sp1与含USP22启动子的萤光素酶报告质粒共转染HepG2细胞,双萤光素酶报告系统检测萤光素酶活性表达.结果 测序及酶切结果显示重组质粒pVAX1-Sp1构建成功;高表达sp1可使USP22启动子的转录活性降低(P＜0.01).结论 成功构建了sp1真核表达质粒,sp1对USP22启动子具有转录抑制作用.
目的 剋隆人sp1基因,構建真覈錶細胞達載體pVAX-Sp1,研究其對USP22基因轉錄活性的影響.方法 Trizol試劑快速提取人肝癌細胞株HepG2總RNA,經RT-PCR擴增Sp1基因序列,與pVAX1真覈錶達載體連接;測序、酶切鑒定重組載體;pVAX1-Sp1與含USP22啟動子的螢光素酶報告質粒共轉染HepG2細胞,雙螢光素酶報告繫統檢測螢光素酶活性錶達.結果 測序及酶切結果顯示重組質粒pVAX1-Sp1構建成功;高錶達sp1可使USP22啟動子的轉錄活性降低(P＜0.01).結論 成功構建瞭sp1真覈錶達質粒,sp1對USP22啟動子具有轉錄抑製作用.
목적 극륭인sp1기인,구건진핵표세포체재체pVAX-Sp1,연구기대USP22기인전록활성적영향.방법 Trizol시제쾌속제취인간암세포주HepG2총RNA,경RT-PCR확증Sp1기인서렬,여pVAX1진핵표체재체련접;측서、매절감정중조재체;pVAX1-Sp1여함USP22계동자적형광소매보고질립공전염HepG2세포,쌍형광소매보고계통검측형광소매활성표체.결과 측서급매절결과현시중조질립pVAX1-Sp1구건성공;고표체sp1가사USP22계동자적전록활성강저(P＜0.01).결론 성공구건료sp1진핵표체질립,sp1대USP22계동자구유전록억제작용.
