东北林业大学学报
東北林業大學學報
동북임업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST FORESTRY UNIVERSITY
2012年
1期
73-75
,共3页
魏晓鹏%李会平%黄大庄%唐秀光
魏曉鵬%李會平%黃大莊%唐秀光
위효붕%리회평%황대장%당수광
白僵菌%RAPD-PCR%正交组合
白僵菌%RAPD-PCR%正交組閤
백강균%RAPD-PCR%정교조합
为了建立一套适宜于白僵菌(Beauveria bassiana)退化研究的RAPD-PCR反应体系及反应程序,通过采用L16( 45)正交试验及退火温度和循环次数的单因素优化对反应体系中的各因素进行优化组合.结果表明:20μL PCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为,10×Buffer 2 μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4 μL,4种dNTP(各2.5mmol/L)0.8 μL,随机引物(10 μmol/L)1.4 μL,TaqDNA聚合酶(5 U/μL)0.4 μL,模板DNA( 10 mg/L)1 μL.反应条件为,94℃预变性2 min,94℃变性30 s,38℃退火40 s,72℃延伸1 min,循环次数40次,72℃延伸5 min.
為瞭建立一套適宜于白僵菌(Beauveria bassiana)退化研究的RAPD-PCR反應體繫及反應程序,通過採用L16( 45)正交試驗及退火溫度和循環次數的單因素優化對反應體繫中的各因素進行優化組閤.結果錶明:20μL PCR反應體繫及反應程序中各因素優化組閤為,10×Buffer 2 μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4 μL,4種dNTP(各2.5mmol/L)0.8 μL,隨機引物(10 μmol/L)1.4 μL,TaqDNA聚閤酶(5 U/μL)0.4 μL,模闆DNA( 10 mg/L)1 μL.反應條件為,94℃預變性2 min,94℃變性30 s,38℃退火40 s,72℃延伸1 min,循環次數40次,72℃延伸5 min.
위료건립일투괄의우백강균(Beauveria bassiana)퇴화연구적RAPD-PCR반응체계급반응정서,통과채용L16( 45)정교시험급퇴화온도화순배차수적단인소우화대반응체계중적각인소진행우화조합.결과표명:20μL PCR반응체계급반응정서중각인소우화조합위,10×Buffer 2 μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4 μL,4충dNTP(각2.5mmol/L)0.8 μL,수궤인물(10 μmol/L)1.4 μL,TaqDNA취합매(5 U/μL)0.4 μL,모판DNA( 10 mg/L)1 μL.반응조건위,94℃예변성2 min,94℃변성30 s,38℃퇴화40 s,72℃연신1 min,순배차수40차,72℃연신5 min.
