中国食品工业
中國食品工業
중국식품공업
CHINA FOOD INDUSTRY
2011年
5期
81-82
,共2页
王倩%马建忠%王永刚%吴玉冰
王倩%馬建忠%王永剛%吳玉冰
왕천%마건충%왕영강%오옥빙
胰岛素原%突变体%套叠PCR
胰島素原%突變體%套疊PCR
이도소원%돌변체%투첩PCR
基因工程人胰岛素作为第一个基因工程药物,自其使用以来解决了许多糖尿病人的疾苦。其后开展的一系列基因工程人胰岛素突变体的研究,发现了一些或长效或速效或高活性的突变体,丰富了治疗用胰岛素的类型。本文根据NCBI数据库中人胰岛素原的一级结构与三级结构模型,设计了-C肽被缩短至4个氨基酸残基(GPGA)的胰岛素突变体,期望该短连接肽在不去除的情况下维持胰岛素活性。依据大肠杆菌K12的密码子偏好性,设计了适宜大肠杆菌表达的该突变体的基因序列。利用套叠PCR方法扩增并克隆了该突变体基因。核苷酸序列测定结果表明,所克隆的突变体基因与设计的核苷酸序列存在2个碱基差异,但是氯基酸序列保持一致。
基因工程人胰島素作為第一箇基因工程藥物,自其使用以來解決瞭許多糖尿病人的疾苦。其後開展的一繫列基因工程人胰島素突變體的研究,髮現瞭一些或長效或速效或高活性的突變體,豐富瞭治療用胰島素的類型。本文根據NCBI數據庫中人胰島素原的一級結構與三級結構模型,設計瞭-C肽被縮短至4箇氨基痠殘基(GPGA)的胰島素突變體,期望該短連接肽在不去除的情況下維持胰島素活性。依據大腸桿菌K12的密碼子偏好性,設計瞭適宜大腸桿菌錶達的該突變體的基因序列。利用套疊PCR方法擴增併剋隆瞭該突變體基因。覈苷痠序列測定結果錶明,所剋隆的突變體基因與設計的覈苷痠序列存在2箇堿基差異,但是氯基痠序列保持一緻。
기인공정인이도소작위제일개기인공정약물,자기사용이래해결료허다당뇨병인적질고。기후개전적일계렬기인공정인이도소돌변체적연구,발현료일사혹장효혹속효혹고활성적돌변체,봉부료치료용이도소적류형。본문근거NCBI수거고중인이도소원적일급결구여삼급결구모형,설계료-C태피축단지4개안기산잔기(GPGA)적이도소돌변체,기망해단련접태재불거제적정황하유지이도소활성。의거대장간균K12적밀마자편호성,설계료괄의대장간균표체적해돌변체적기인서렬。이용투첩PCR방법확증병극륭료해돌변체기인。핵감산서렬측정결과표명,소극륭적돌변체기인여설계적핵감산서렬존재2개감기차이,단시록기산서렬보지일치。