中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2012年
1期
164-167
,共4页
吴水燕%胡绍燕%岑建农%陈子兴
吳水燕%鬍紹燕%岑建農%陳子興
오수연%호소연%잠건농%진자흥
胰岛素样生长因子结合蛋白7基因%慢病毒载体%293T细胞%K562细胞
胰島素樣生長因子結閤蛋白7基因%慢病毒載體%293T細胞%K562細胞
이도소양생장인자결합단백7기인%만병독재체%293T세포%K562세포
本研究构建胰岛素样生长因子结合蛋白7( IGFBP7)基因的慢病毒载体,为研究该基因在白血病中的作用提供基础.采用限制性内切酶酶切获得目的基因,基因重组构建慢病毒载体质粒venus-IGFBP7,用293T细胞包装慢病毒颗粒,感染K562细胞,并采用多种方法鉴定.结果表明,所获IGFBP7基因经测序与GenBank比对序列一致,慢病毒载体质粒venus-IGFBP7经BamH Ⅰ酶切鉴定片段大小正确,荧光显微镜及流式细胞术检测到绿色荧光蛋白在293T及K562细胞中表达,RT-PCR和Western blot检测到IGFBP7 mRNA和蛋白在K562细胞表达.结论:成功构建带有IGFBP7基因的慢病毒载体,为研究IGFBP7基因在K562细胞中的作用奠定了基础.
本研究構建胰島素樣生長因子結閤蛋白7( IGFBP7)基因的慢病毒載體,為研究該基因在白血病中的作用提供基礎.採用限製性內切酶酶切穫得目的基因,基因重組構建慢病毒載體質粒venus-IGFBP7,用293T細胞包裝慢病毒顆粒,感染K562細胞,併採用多種方法鑒定.結果錶明,所穫IGFBP7基因經測序與GenBank比對序列一緻,慢病毒載體質粒venus-IGFBP7經BamH Ⅰ酶切鑒定片段大小正確,熒光顯微鏡及流式細胞術檢測到綠色熒光蛋白在293T及K562細胞中錶達,RT-PCR和Western blot檢測到IGFBP7 mRNA和蛋白在K562細胞錶達.結論:成功構建帶有IGFBP7基因的慢病毒載體,為研究IGFBP7基因在K562細胞中的作用奠定瞭基礎.
본연구구건이도소양생장인자결합단백7( IGFBP7)기인적만병독재체,위연구해기인재백혈병중적작용제공기출.채용한제성내절매매절획득목적기인,기인중조구건만병독재체질립venus-IGFBP7,용293T세포포장만병독과립,감염K562세포,병채용다충방법감정.결과표명,소획IGFBP7기인경측서여GenBank비대서렬일치,만병독재체질립venus-IGFBP7경BamH Ⅰ매절감정편단대소정학,형광현미경급류식세포술검측도록색형광단백재293T급K562세포중표체,RT-PCR화Western blot검측도IGFBP7 mRNA화단백재K562세포표체.결론:성공구건대유IGFBP7기인적만병독재체,위연구IGFBP7기인재K562세포중적작용전정료기출.
