CAJ | 학술논문

目的:研究肿瘤坏死因子-β(TNF-β)对重型再生障碍性贫血(SAA)患者效应T细胞(CD8+HLA-DR+T细胞)损伤骨髓造血的影响,探讨TNF-β在SAA免疫发病中的作用.方法:以免疫磁珠阳性分选15例SAA患者骨髓CD8+HLA-DR+T细胞作为效应细胞,以阴性分选去除15名正常人骨髓单个核细胞中CD3+T细胞后作为靶细胞,两者混合培养,于体系中分别加入不同浓度TNF-β(终浓度分别为0、15、25、50ng/ml)为实验组,并设空白对照组,孵育72小时后,通过流式细胞术以Annexin V检测靶细胞凋亡状况,采用ELISA法测定培养上清液IL-10、IFN-γ水平.结果:空白对照组及3个实验组细胞凋亡比例分别为(49.85±20.33)%、(51.65 ±20.34)%、(55.94 ±20.19)%、(57.72 ±19.45)%,TNF-β终浓度为50 ng/ml组及25 ng/ml组均明显高于空白组和15 ng/ml组细胞凋亡比例(P<0.05),但空白组与15 ng/ml组,25 ng/ml组与50 ng/ml组细胞凋亡比例无显著差异(P>0.05).空白对照组及各实验组培养上清IL-10浓度分别为(217.99±29.47)ng/ml、(216.47±29.00)ng/ml、(212.15±13.19)ng/ml、(218.01±28.61)ng/ml,各组差异无统计学意义(P>0.05).TNF-β终浓度50 ng/ml 组培养上清IFN-γ水平[(593.50±48.18)ng/ml]明显高于空白对照组[(544.85±69.77)ng/ml],15 ng/ml组[(567.38±74.51)ng/ml]、25 ng/ml组[(544.05±79.69)ng/ml](P<0.05).结论:TNF-β能增强SAA患者效应T细胞诱导骨髓造血细胞凋亡,并呈浓度依赖性;高水平的TNF-β可能还促进SAA患者CD8+HLA-DR+T细胞分泌IFN-γ,两者具有协同细胞毒作用.
목적:연구종류배사인자-β(TNF-β)대중형재생장애성빈혈(SAA)환자효응T세포(CD8+HLA-DR+T세포)손상골수조혈적영향,탐토TNF-β재SAA면역발병중적작용.방법:이면역자주양성분선15례SAA환자골수CD8+HLA-DR+T세포작위효응세포,이음성분선거제15명정상인골수단개핵세포중CD3+T세포후작위파세포,량자혼합배양,우체계중분별가입불동농도TNF-β(종농도분별위0、15、25、50ng/ml)위실험조,병설공백대조조,부육72소시후,통과류식세포술이Annexin V검측파세포조망상황,채용ELISA법측정배양상청액IL-10、IFN-γ수평.결과:공백대조조급3개실험조세포조망비례분별위(49.85±20.33)%、(51.65 ±20.34)%、(55.94 ±20.19)%、(57.72 ±19.45)%,TNF-β종농도위50 ng/ml조급25 ng/ml조균명현고우공백조화15 ng/ml조세포조망비례(P<0.05),단공백조여15 ng/ml조,25 ng/ml조여50 ng/ml조세포조망비례무현저차이(P>0.05).공백대조조급각실험조배양상청IL-10농도분별위(217.99±29.47)ng/ml、(216.47±29.00)ng/ml、(212.15±13.19)ng/ml、(218.01±28.61)ng/ml,각조차이무통계학의의(P>0.05).TNF-β종농도50 ng/ml 조배양상청IFN-γ수평[(593.50±48.18)ng/ml]명현고우공백대조조[(544.85±69.77)ng/ml],15 ng/ml조[(567.38±74.51)ng/ml]、25 ng/ml조[(544.05±79.69)ng/ml](P<0.05).결론:TNF-β능증강SAA환자효응T세포유도골수조혈세포조망,병정농도의뢰성;고수평적TNF-β가능환촉진SAA환자CD8+HLA-DR+T세포분비IFN-γ,량자구유협동세포독작용.