中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2012年
2期
258-261
,共4页
吕建%陈智超%李秋柏%邵菁%游泳%邹萍
呂建%陳智超%李鞦柏%邵菁%遊泳%鄒萍
려건%진지초%리추백%소정%유영%추평
livin基因%siRNA%RNA干扰%K562细胞%细胞凋亡
livin基因%siRNA%RNA榦擾%K562細胞%細胞凋亡
livin기인%siRNA%RNA간우%K562세포%세포조망
本研究探讨小分子RNA干扰技术抑制livin基因表达对白血病细胞系K562细胞凋亡的影响.设计合成livin特异性小干扰RNA(siRNA),核转染K562细胞,培养转染后的K562细胞,用RT-PCR检测livin mRNA的表达,Western blot检测Livin蛋白的表达.以未转染细胞作对照,同时转染带有增强型绿色荧光蛋白的载体作为阳性对照,用流式细胞术检测其细胞绿色荧光以确定转染效率.用膜联蛋白Ⅴ及碘化丙锭双染法检测细胞凋亡率.结果表明,电穿孔的转染效率可达50％.siRNA既可以抑制livin mRNA表达,也可以抑制livin蛋白表达.特异性siRNA转染细胞后48h细胞凋亡率为(27.41±2.30)％,与对照组(9.63±0.89％)比较明显提高(P＜0.05).结论:SiRNA可以抑制livin基因的表达,并能抑制livin基因的抗凋亡作用.
本研究探討小分子RNA榦擾技術抑製livin基因錶達對白血病細胞繫K562細胞凋亡的影響.設計閤成livin特異性小榦擾RNA(siRNA),覈轉染K562細胞,培養轉染後的K562細胞,用RT-PCR檢測livin mRNA的錶達,Western blot檢測Livin蛋白的錶達.以未轉染細胞作對照,同時轉染帶有增彊型綠色熒光蛋白的載體作為暘性對照,用流式細胞術檢測其細胞綠色熒光以確定轉染效率.用膜聯蛋白Ⅴ及碘化丙錠雙染法檢測細胞凋亡率.結果錶明,電穿孔的轉染效率可達50％.siRNA既可以抑製livin mRNA錶達,也可以抑製livin蛋白錶達.特異性siRNA轉染細胞後48h細胞凋亡率為(27.41±2.30)％,與對照組(9.63±0.89％)比較明顯提高(P＜0.05).結論:SiRNA可以抑製livin基因的錶達,併能抑製livin基因的抗凋亡作用.
본연구탐토소분자RNA간우기술억제livin기인표체대백혈병세포계K562세포조망적영향.설계합성livin특이성소간우RNA(siRNA),핵전염K562세포,배양전염후적K562세포,용RT-PCR검측livin mRNA적표체,Western blot검측Livin단백적표체.이미전염세포작대조,동시전염대유증강형록색형광단백적재체작위양성대조,용류식세포술검측기세포록색형광이학정전염효솔.용막련단백Ⅴ급전화병정쌍염법검측세포조망솔.결과표명,전천공적전염효솔가체50％.siRNA기가이억제livin mRNA표체,야가이억제livin단백표체.특이성siRNA전염세포후48h세포조망솔위(27.41±2.30)％,여대조조(9.63±0.89％)비교명현제고(P＜0.05).결론:SiRNA가이억제livin기인적표체,병능억제livin기인적항조망작용.
