中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2012年
7期
17-20
,共4页
奶山羊%乳腺%5-HTR4%克隆%序列分析%原核表达
奶山羊%乳腺%5-HTR4%剋隆%序列分析%原覈錶達
내산양%유선%5-HTR4%극륭%서렬분석%원핵표체
利用同源序列克隆原理设计5-羟色胺受体4(5-HTR4)一对克隆引物,对萨能奶山羊乳腺组织中5-HTR4进行克隆、测序,并进行分析；再根据克隆序列设计引物,从重组克隆载体中扩增出含Bam H Ⅰ/Xho Ⅰ酶切位点的5-HTR4片段,酶切后亚克隆至pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达载体pGEX-5-HTR4,经IPTG诱导进行表达、鉴定.奶山羊5-HTR4基因的ORF与兔(Z50162)、猪(NM-001173418)、人(human5HT1D)、狗(NM-001003280)和鼠(AK082016)的同源性分别为46.1％、47.2％、78.9％、45.8％及89.8％.Smart分析发现,奶山羊5-HTR4基因推测氨基酸序列信号肽与人、鼠5-HTR4基因氨基酸序列信号肽均为1～23aa,SapB结构域均为49～126aa,结构特征与人、鼠的5-HTR4结构特征相一致.
利用同源序列剋隆原理設計5-羥色胺受體4(5-HTR4)一對剋隆引物,對薩能奶山羊乳腺組織中5-HTR4進行剋隆、測序,併進行分析；再根據剋隆序列設計引物,從重組剋隆載體中擴增齣含Bam H Ⅰ/Xho Ⅰ酶切位點的5-HTR4片段,酶切後亞剋隆至pGEX-4T-1載體,構建重組原覈錶達載體pGEX-5-HTR4,經IPTG誘導進行錶達、鑒定.奶山羊5-HTR4基因的ORF與兔(Z50162)、豬(NM-001173418)、人(human5HT1D)、狗(NM-001003280)和鼠(AK082016)的同源性分彆為46.1％、47.2％、78.9％、45.8％及89.8％.Smart分析髮現,奶山羊5-HTR4基因推測氨基痠序列信號肽與人、鼠5-HTR4基因氨基痠序列信號肽均為1～23aa,SapB結構域均為49～126aa,結構特徵與人、鼠的5-HTR4結構特徵相一緻.
이용동원서렬극륭원리설계5-간색알수체4(5-HTR4)일대극륭인물,대살능내산양유선조직중5-HTR4진행극륭、측서,병진행분석；재근거극륭서렬설계인물,종중조극륭재체중확증출함Bam H Ⅰ/Xho Ⅰ매절위점적5-HTR4편단,매절후아극륭지pGEX-4T-1재체,구건중조원핵표체재체pGEX-5-HTR4,경IPTG유도진행표체、감정.내산양5-HTR4기인적ORF여토(Z50162)、저(NM-001173418)、인(human5HT1D)、구(NM-001003280)화서(AK082016)적동원성분별위46.1％、47.2％、78.9％、45.8％급89.8％.Smart분석발현,내산양5-HTR4기인추측안기산서렬신호태여인、서5-HTR4기인안기산서렬신호태균위1～23aa,SapB결구역균위49～126aa,결구특정여인、서적5-HTR4결구특정상일치.
