中国现代医生
中國現代醫生
중국현대의생
CHINA MODERN DOCTOR
2012年
3期
9-10,15
,共3页
杜蓬%吴森林%钟雅文%孙爱华
杜蓬%吳森林%鐘雅文%孫愛華
두봉%오삼림%종아문%손애화
淋病奈瑟菌%nspA基因%克隆/重组表达%免疫原性鉴定
淋病奈瑟菌%nspA基因%剋隆/重組錶達%免疫原性鑒定
임병내슬균%nspA기인%극륭/중조표체%면역원성감정
目的 克隆并构建淋病奈瑟菌表面蛋白A(nspA)基因原核表达系统,并对重组产物rNspA进行免疫原性鉴定.方法 采用PCR扩增nspA基因,构建nspA基因原核表达系统.SDS-PAGE检测目的重组蛋白rNspA表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rNspA,免疫双扩散试验及Western Blot鉴定rNspA的免疫原性.结果 克隆的nspA基因与GenBank中相关序列相似性为100％,rNspA表达量为细菌总蛋白的40.1％,提纯的rNspA在SDS-PAGE后显示为单一的蛋白条带.rNspA抗血清免疫双扩散效价为1:4,rNspA抗血清能有效识别rNspA.结论 所构建的nspA基因原核表达系统能高效表达rNspA,表达的产物有良好的免疫原性,为淋病奈瑟菌免疫疫苗的研制奠定基础.
目的 剋隆併構建淋病奈瑟菌錶麵蛋白A(nspA)基因原覈錶達繫統,併對重組產物rNspA進行免疫原性鑒定.方法 採用PCR擴增nspA基因,構建nspA基因原覈錶達繫統.SDS-PAGE檢測目的重組蛋白rNspA錶達情況,Ni-NTA親和層析法提純rNspA,免疫雙擴散試驗及Western Blot鑒定rNspA的免疫原性.結果 剋隆的nspA基因與GenBank中相關序列相似性為100％,rNspA錶達量為細菌總蛋白的40.1％,提純的rNspA在SDS-PAGE後顯示為單一的蛋白條帶.rNspA抗血清免疫雙擴散效價為1:4,rNspA抗血清能有效識彆rNspA.結論 所構建的nspA基因原覈錶達繫統能高效錶達rNspA,錶達的產物有良好的免疫原性,為淋病奈瑟菌免疫疫苗的研製奠定基礎.
목적 극륭병구건임병내슬균표면단백A(nspA)기인원핵표체계통,병대중조산물rNspA진행면역원성감정.방법 채용PCR확증nspA기인,구건nspA기인원핵표체계통.SDS-PAGE검측목적중조단백rNspA표체정황,Ni-NTA친화층석법제순rNspA,면역쌍확산시험급Western Blot감정rNspA적면역원성.결과 극륭적nspA기인여GenBank중상관서렬상사성위100％,rNspA표체량위세균총단백적40.1％,제순적rNspA재SDS-PAGE후현시위단일적단백조대.rNspA항혈청면역쌍확산효개위1:4,rNspA항혈청능유효식별rNspA.결론 소구건적nspA기인원핵표체계통능고효표체rNspA,표체적산물유량호적면역원성,위임병내슬균면역역묘적연제전정기출.
