哺乳动物细胞表面展示人源HIV特异性全长抗体库的构建
포유동물세포표면전시인원HIV특이성전장항체고적구건
Construction of HIV-specific Full-length Human Antibody Library
  • 万方数据
    中国医药指南 중국의약지남
    CHINA MEDICINE GUIDE
    2011年 21期 5-7 ,共3页

    周烨%李长征%陈振瑞%贺微%杨于军%刘叔文%吴曙光%马丽英%姜世勃%周辰

    주엽%리장정%진진서%하미%양우군%류숙문%오서광%마려영%강세발%주신

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    目的 构建人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库.方法 提取HIV患者外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR的方法扩增抗体重链可变区(VH)基因,插入哺乳动物细胞表达载体pDGB4,转化感受态大肠杆菌TOPO-10,构建抗体基因库,随后将抗体库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞,获得可稳定展示全长抗体的细胞库,用流式细胞仪分析全长抗体在FCHO细胞表面的表达.结果 本研究以少量外周血淋巴细胞RNA为来源,构建了库容量为7.77×104的全长抗体基因库;将基因库的质粒DNA稳定转染FCHO细胞后,获得了可稳定展示全长抗体的细胞库;经流式细胞仪分析,有67%的细胞表面可表达可被检测到的全长抗体.结论 本研究构建了人源的HIV特异性全长抗体基因库并获得可稳定展示全长抗体的哺乳动物细胞库,为治疗HIV感染的特异性抗体的筛选打下了基础.
    목적 구건인원적HIV특이성전장항체기인고병획득가은정전시전장항체적포유동물세포고.방법 제취HIV환자외주혈림파세포적총RNA,채용RT-PCR적방법확증항체중련가변구(VH)기인,삽입포유동물세포표체재체pDGB4,전화감수태대장간균TOPO-10,구건항체기인고,수후장항체고적질립DNA은정전염FCHO세포,획득가은정전시전장항체적세포고,용류식세포의분석전장항체재FCHO세포표면적표체.결과 본연구이소량외주혈림파세포RNA위래원,구건료고용량위7.77×104적전장항체기인고;장기인고적질립DNA은정전염FCHO세포후,획득료가은정전시전장항체적세포고;경류식세포의분석,유67%적세포표면가표체가피검측도적전장항체.결론 본연구구건료인원적HIV특이성전장항체기인고병획득가은정전시전장항체적포유동물세포고,위치료HIV감염적특이성항체적사선타하료기출.
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