中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
40期
7439-7442
,共4页
扎拉嘎胡%陈莉%兰晓霞%陈晓%陈小义
扎拉嘎鬍%陳莉%蘭曉霞%陳曉%陳小義
찰랍알호%진리%란효하%진효%진소의
脐带%间充质干细胞%成骨细胞%细胞分化%诱导
臍帶%間充質榦細胞%成骨細胞%細胞分化%誘導
제대%간충질간세포%성골세포%세포분화%유도
背景: 人脐带间充质干细胞含量丰富,较为原始,分化能力强,免疫原性低,是细胞治疗的理想靶细胞.目的: 体外分离培养脐带间充质干细胞并将其定向诱导为成骨细胞.方法: 无菌条件下培养脐带间充质干细胞,分为诱导组和对照组,诱导组用成骨诱导液处理、对照组为干细胞培养液处理.倒置光显微镜观察细胞形态,MTT法测细胞增殖,荧光双染法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞周期与细胞表面标记.诱导后:检测碱性磷酸酶,Von Kossa染色分析钙盐沉积,RT-PCR检测骨桥蛋白基因、碱性磷酸酶、骨唾液蛋白mRNA的表达.结果与结论: 传代细胞形态稳定、活力好,高标达CD44.诱导后von Kossa染色表现为阳性.碱性磷酸酶活性诱导组比对照组高(P<0.05),不同时间点比较21 d最高(P<0.05).RT-PCR显示:诱导组21,28d碱性磷酸酶mRNA表达均较与对照组增强(P<0.05).诱导组有骨唾液蛋白和骨桥蛋白基因mRNA表达.提示,人脐带间充质干细胞能够定向分化为成骨细胞.
揹景: 人臍帶間充質榦細胞含量豐富,較為原始,分化能力彊,免疫原性低,是細胞治療的理想靶細胞.目的: 體外分離培養臍帶間充質榦細胞併將其定嚮誘導為成骨細胞.方法: 無菌條件下培養臍帶間充質榦細胞,分為誘導組和對照組,誘導組用成骨誘導液處理、對照組為榦細胞培養液處理.倒置光顯微鏡觀察細胞形態,MTT法測細胞增殖,熒光雙染法檢測細胞活力,流式細胞儀檢測細胞週期與細胞錶麵標記.誘導後:檢測堿性燐痠酶,Von Kossa染色分析鈣鹽沉積,RT-PCR檢測骨橋蛋白基因、堿性燐痠酶、骨唾液蛋白mRNA的錶達.結果與結論: 傳代細胞形態穩定、活力好,高標達CD44.誘導後von Kossa染色錶現為暘性.堿性燐痠酶活性誘導組比對照組高(P<0.05),不同時間點比較21 d最高(P<0.05).RT-PCR顯示:誘導組21,28d堿性燐痠酶mRNA錶達均較與對照組增彊(P<0.05).誘導組有骨唾液蛋白和骨橋蛋白基因mRNA錶達.提示,人臍帶間充質榦細胞能夠定嚮分化為成骨細胞.
배경: 인제대간충질간세포함량봉부,교위원시,분화능력강,면역원성저,시세포치료적이상파세포.목적: 체외분리배양제대간충질간세포병장기정향유도위성골세포.방법: 무균조건하배양제대간충질간세포,분위유도조화대조조,유도조용성골유도액처리、대조조위간세포배양액처리.도치광현미경관찰세포형태,MTT법측세포증식,형광쌍염법검측세포활력,류식세포의검측세포주기여세포표면표기.유도후:검측감성린산매,Von Kossa염색분석개염침적,RT-PCR검측골교단백기인、감성린산매、골타액단백mRNA적표체.결과여결론: 전대세포형태은정、활력호,고표체CD44.유도후von Kossa염색표현위양성.감성린산매활성유도조비대조조고(P<0.05),불동시간점비교21 d최고(P<0.05).RT-PCR현시:유도조21,28d감성린산매mRNA표체균교여대조조증강(P<0.05).유도조유골타액단백화골교단백기인mRNA표체.제시,인제대간충질간세포능구정향분화위성골세포.
