中国实用医药
中國實用醫藥
중국실용의약
CHINA PRACTICAL MEDICAL
2009年
31期
44-46
,共3页
食管癌%抑制消减杂交技术
食管癌%抑製消減雜交技術
식관암%억제소감잡교기술
目的 采用抑制消减杂交技术,分析食管癌手术前后免疫相关的基因表达差异,了解手术治疗对食管癌患者免疫功能的影响.方法 选5例食管肿瘤患者,在手术治疗前和结束时每例患者分别取10 ml外周静脉血,样本采集后马上进行外周血单个核细胞(PMBC)分离及提取RNA.分为2组,手术前组和手术后组.每组5个人的RNA混合后做cDNA合成.治疗后组和治疗前组进行正向比较,cDNA经两轮杂交与PCR扩增后T/A克隆构建文库,并对克隆进行PCR扩增,选取部分阳性克隆测序,与GenBank同源比较,分析其生物学意义.结果 用SSH法建立食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的cDNA文库,通过筛选,发现在食管癌手术后,含有与免疫相关的基因,如IL-2、化学趋化因子受体4等表达较前增强,提示食管癌手术改善患者的免疫功能.另外还发现肿瘤相关基因CHES1表达较前增强,另外还发现了3个未知序列.结论 成功通过SSH建立了食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的消减文库,核酸序列分析结果表明其中部分基因为与炎症相关的基因,部分基因与癌症形成相关,还发现了一些未知序列.
目的 採用抑製消減雜交技術,分析食管癌手術前後免疫相關的基因錶達差異,瞭解手術治療對食管癌患者免疫功能的影響.方法 選5例食管腫瘤患者,在手術治療前和結束時每例患者分彆取10 ml外週靜脈血,樣本採集後馬上進行外週血單箇覈細胞(PMBC)分離及提取RNA.分為2組,手術前組和手術後組.每組5箇人的RNA混閤後做cDNA閤成.治療後組和治療前組進行正嚮比較,cDNA經兩輪雜交與PCR擴增後T/A剋隆構建文庫,併對剋隆進行PCR擴增,選取部分暘性剋隆測序,與GenBank同源比較,分析其生物學意義.結果 用SSH法建立食管癌手術前後免疫相關的差異錶達基因的cDNA文庫,通過篩選,髮現在食管癌手術後,含有與免疫相關的基因,如IL-2、化學趨化因子受體4等錶達較前增彊,提示食管癌手術改善患者的免疫功能.另外還髮現腫瘤相關基因CHES1錶達較前增彊,另外還髮現瞭3箇未知序列.結論 成功通過SSH建立瞭食管癌手術前後免疫相關的差異錶達基因的消減文庫,覈痠序列分析結果錶明其中部分基因為與炎癥相關的基因,部分基因與癌癥形成相關,還髮現瞭一些未知序列.
목적 채용억제소감잡교기술,분석식관암수술전후면역상관적기인표체차이,료해수술치료대식관암환자면역공능적영향.방법 선5례식관종류환자,재수술치료전화결속시매례환자분별취10 ml외주정맥혈,양본채집후마상진행외주혈단개핵세포(PMBC)분리급제취RNA.분위2조,수술전조화수술후조.매조5개인적RNA혼합후주cDNA합성.치료후조화치료전조진행정향비교,cDNA경량륜잡교여PCR확증후T/A극륭구건문고,병대극륭진행PCR확증,선취부분양성극륭측서,여GenBank동원비교,분석기생물학의의.결과 용SSH법건립식관암수술전후면역상관적차이표체기인적cDNA문고,통과사선,발현재식관암수술후,함유여면역상관적기인,여IL-2、화학추화인자수체4등표체교전증강,제시식관암수술개선환자적면역공능.령외환발현종류상관기인CHES1표체교전증강,령외환발현료3개미지서렬.결론 성공통과SSH건립료식관암수술전후면역상관적차이표체기인적소감문고,핵산서렬분석결과표명기중부분기인위여염증상관적기인,부분기인여암증형성상관,환발현료일사미지서렬.
