生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2008年
6期
42-45
,共4页
尤卫艳%黄华宏%童再康%朱玉球
尤衛豔%黃華宏%童再康%硃玉毬
우위염%황화굉%동재강%주옥구
光皮桦%DNA提取%AFLP反应体系
光皮樺%DNA提取%AFLP反應體繫
광피화%DNA제취%AFLP반응체계
为了建立光皮桦AFLP分子标记体系,利用SDS法、常规CTAB法和CTAB-硅珠法提取光皮桦(Betula luminifera H.Wink.)嫩叶DNA,并进行检测比较.结果显示,CTAB-硅珠法更适合光皮桦基因组DNA的提取,所得在基因组DNA纯度高OD值在1.8左右,适用于AFLP分析.利用AVLP分子标记技术,采用Mse I-EcoRI酶切组合,从64个引物组合中筛选出51个带型分布均匀、多态性高且分辨能力强的引物组合.同时,通过对比实验确定了光皮桦AFLP反应的最佳模板DNA用量为300ng、酶切时间4h和预扩增产物稀释倍数30倍等,优化了相关AFLP反应体系,为今后利用AFLP分子标记技术研究光皮桦野生居群的遗传多样性分析和分子遗传图谱的构建打下坚实的基础.
為瞭建立光皮樺AFLP分子標記體繫,利用SDS法、常規CTAB法和CTAB-硅珠法提取光皮樺(Betula luminifera H.Wink.)嫩葉DNA,併進行檢測比較.結果顯示,CTAB-硅珠法更適閤光皮樺基因組DNA的提取,所得在基因組DNA純度高OD值在1.8左右,適用于AFLP分析.利用AVLP分子標記技術,採用Mse I-EcoRI酶切組閤,從64箇引物組閤中篩選齣51箇帶型分佈均勻、多態性高且分辨能力彊的引物組閤.同時,通過對比實驗確定瞭光皮樺AFLP反應的最佳模闆DNA用量為300ng、酶切時間4h和預擴增產物稀釋倍數30倍等,優化瞭相關AFLP反應體繫,為今後利用AFLP分子標記技術研究光皮樺野生居群的遺傳多樣性分析和分子遺傳圖譜的構建打下堅實的基礎.
위료건립광피화AFLP분자표기체계,이용SDS법、상규CTAB법화CTAB-규주법제취광피화(Betula luminifera H.Wink.)눈협DNA,병진행검측비교.결과현시,CTAB-규주법경괄합광피화기인조DNA적제취,소득재기인조DNA순도고OD치재1.8좌우,괄용우AFLP분석.이용AVLP분자표기기술,채용Mse I-EcoRI매절조합,종64개인물조합중사선출51개대형분포균균、다태성고차분변능력강적인물조합.동시,통과대비실험학정료광피화AFLP반응적최가모판DNA용량위300ng、매절시간4h화예확증산물희석배수30배등,우화료상관AFLP반응체계,위금후이용AFLP분자표기기술연구광피화야생거군적유전다양성분석화분자유전도보적구건타하견실적기출.
