中国普外基础与临床杂志
中國普外基礎與臨床雜誌
중국보외기출여림상잡지
CHINESE JOURNAL OF BASES AND CLINICS IN GENERAL SURGERY
2008年
11期
829-834
,共6页
何满西%李耿%姚有贵%蒲道深%田伯乐%胡伟明%张肇达
何滿西%李耿%姚有貴%蒲道深%田伯樂%鬍偉明%張肇達
하만서%리경%요유귀%포도심%전백악%호위명%장조체
RNA干扰%胰腺癌%生存蛋白%凋亡
RNA榦擾%胰腺癌%生存蛋白%凋亡
RNA간우%이선암%생존단백%조망
目的 构建胰腺癌细胞生存蛋白(survivin)表达的RNA干扰(RNAi)抑制载体,并研究其对survivin表达的抑制作用.方法 用免疫荧光技术和RT-PCR检测胰腺癌细胞PANC-1中survivin及其mRNA的表达,并把survivin基因克隆到T载体进行测序; 构建针对survivin缺失碱基基因和survivin基因的RNAi载体si-svv-1和si-svv-2,用脂质体转染胰腺癌细胞PANC-1后,用RT-PCR、DNA梯状电泳及流式细胞术分析比较2种干扰载体对survivin mRNA表达的抑制情况和检测细胞凋亡.结果 survivin在胰腺癌细胞PANC-1中高表达; si-svv-2对survivin mRNA的表达抑制率达(72.43±8.04)%,而si-svv-1为0; si-svv-2能诱导胰腺癌细胞PANC-1的凋亡, 72 h细胞凋亡率达(12.36±1.44)%.结论 本研究成功建立胰腺癌细胞survivin表达RNAi抑制载体,该载体可特异有效地抑制胰腺癌细胞PANC-1 survivin的表达并诱导胰腺癌细胞PANC-1凋亡.
目的 構建胰腺癌細胞生存蛋白(survivin)錶達的RNA榦擾(RNAi)抑製載體,併研究其對survivin錶達的抑製作用.方法 用免疫熒光技術和RT-PCR檢測胰腺癌細胞PANC-1中survivin及其mRNA的錶達,併把survivin基因剋隆到T載體進行測序; 構建針對survivin缺失堿基基因和survivin基因的RNAi載體si-svv-1和si-svv-2,用脂質體轉染胰腺癌細胞PANC-1後,用RT-PCR、DNA梯狀電泳及流式細胞術分析比較2種榦擾載體對survivin mRNA錶達的抑製情況和檢測細胞凋亡.結果 survivin在胰腺癌細胞PANC-1中高錶達; si-svv-2對survivin mRNA的錶達抑製率達(72.43±8.04)%,而si-svv-1為0; si-svv-2能誘導胰腺癌細胞PANC-1的凋亡, 72 h細胞凋亡率達(12.36±1.44)%.結論 本研究成功建立胰腺癌細胞survivin錶達RNAi抑製載體,該載體可特異有效地抑製胰腺癌細胞PANC-1 survivin的錶達併誘導胰腺癌細胞PANC-1凋亡.
목적 구건이선암세포생존단백(survivin)표체적RNA간우(RNAi)억제재체,병연구기대survivin표체적억제작용.방법 용면역형광기술화RT-PCR검측이선암세포PANC-1중survivin급기mRNA적표체,병파survivin기인극륭도T재체진행측서; 구건침대survivin결실감기기인화survivin기인적RNAi재체si-svv-1화si-svv-2,용지질체전염이선암세포PANC-1후,용RT-PCR、DNA제상전영급류식세포술분석비교2충간우재체대survivin mRNA표체적억제정황화검측세포조망.결과 survivin재이선암세포PANC-1중고표체; si-svv-2대survivin mRNA적표체억제솔체(72.43±8.04)%,이si-svv-1위0; si-svv-2능유도이선암세포PANC-1적조망, 72 h세포조망솔체(12.36±1.44)%.결론 본연구성공건립이선암세포survivin표체RNAi억제재체,해재체가특이유효지억제이선암세포PANC-1 survivin적표체병유도이선암세포PANC-1조망.