细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
11期
1055-1058
,共4页
路静%刘康栋%赵明耀%杨洪艳%黄幼田%秦珍珠%白睿华%董子明
路靜%劉康棟%趙明耀%楊洪豔%黃幼田%秦珍珠%白睿華%董子明
로정%류강동%조명요%양홍염%황유전%진진주%백예화%동자명
食管肿瘤%树突状细胞%匀浆上清%混合淋巴细胞反应%细胞毒性T细胞
食管腫瘤%樹突狀細胞%勻漿上清%混閤淋巴細胞反應%細胞毒性T細胞
식관종류%수돌상세포%균장상청%혼합림파세포반응%세포독성T세포
目的:探讨食管癌组织匀浆上清液体外模拟肿瘤微环境对人树突状细胞(DC)分化发育的影响, 揭示肿瘤免疫逃逸机制, 为DC疫苗的应用提供理论基础.方法:制备新鲜食管癌及癌旁组织匀浆上清液, ELISA检测其VEGF-A含量.密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞, 含rhGM-CSF和rhIL- 4 RPMI1640培养液诱导DC, 第2天在继续诱导DC基础上设食管癌匀浆上清组、癌旁匀浆上清组、 VEGF-A组, 均隔天半量换液, 第4天加入食管癌细胞株EC9706抗原, 第6天加入脂多糖, 第8天收集各组细胞.观察DC形态, 流式细胞术(FCM)检测免疫表型, RT-PCR检测CD1a表达, CCK-8检测T细胞增殖率及杀伤率.结果:食管癌组织匀浆上清VEGF-A含量[(0.987±0.319) μg/L]明显高于癌旁[(0.152±0.105) μg/L, P<0.05]; 食管癌匀浆上清组细胞形态明显受到抑制, CD86分子阳性率(%)与正常DC相比由69±8降为42±11、 CD1a由56±12降为27±12、 CD11c由21±13降为18±13(P<0.01), CD1a基因几乎无表达, 刺激T细胞增殖率(%)由112.5±7.2降为70.2±3.5(P<0.01), 杀伤率(%)由62.4±0.6 降为46.8±1.6(P<0.01); 癌旁匀浆上清液组、 VEGF-A组结果与正常DC组无统计学意义.结论:食管癌组织匀浆上清液所模拟的微环境对DC的诱导分化及其功能有明显的抑制作用, 在该抑制作用中VEGF-A并不起主要作用.
目的:探討食管癌組織勻漿上清液體外模擬腫瘤微環境對人樹突狀細胞(DC)分化髮育的影響, 揭示腫瘤免疫逃逸機製, 為DC疫苗的應用提供理論基礎.方法:製備新鮮食管癌及癌徬組織勻漿上清液, ELISA檢測其VEGF-A含量.密度梯度離心法分離人外週血單箇覈細胞, 含rhGM-CSF和rhIL- 4 RPMI1640培養液誘導DC, 第2天在繼續誘導DC基礎上設食管癌勻漿上清組、癌徬勻漿上清組、 VEGF-A組, 均隔天半量換液, 第4天加入食管癌細胞株EC9706抗原, 第6天加入脂多糖, 第8天收集各組細胞.觀察DC形態, 流式細胞術(FCM)檢測免疫錶型, RT-PCR檢測CD1a錶達, CCK-8檢測T細胞增殖率及殺傷率.結果:食管癌組織勻漿上清VEGF-A含量[(0.987±0.319) μg/L]明顯高于癌徬[(0.152±0.105) μg/L, P<0.05]; 食管癌勻漿上清組細胞形態明顯受到抑製, CD86分子暘性率(%)與正常DC相比由69±8降為42±11、 CD1a由56±12降為27±12、 CD11c由21±13降為18±13(P<0.01), CD1a基因幾乎無錶達, 刺激T細胞增殖率(%)由112.5±7.2降為70.2±3.5(P<0.01), 殺傷率(%)由62.4±0.6 降為46.8±1.6(P<0.01); 癌徬勻漿上清液組、 VEGF-A組結果與正常DC組無統計學意義.結論:食管癌組織勻漿上清液所模擬的微環境對DC的誘導分化及其功能有明顯的抑製作用, 在該抑製作用中VEGF-A併不起主要作用.
목적:탐토식관암조직균장상청액체외모의종류미배경대인수돌상세포(DC)분화발육적영향, 게시종류면역도일궤제, 위DC역묘적응용제공이론기출.방법:제비신선식관암급암방조직균장상청액, ELISA검측기VEGF-A함량.밀도제도리심법분리인외주혈단개핵세포, 함rhGM-CSF화rhIL- 4 RPMI1640배양액유도DC, 제2천재계속유도DC기출상설식관암균장상청조、암방균장상청조、 VEGF-A조, 균격천반량환액, 제4천가입식관암세포주EC9706항원, 제6천가입지다당, 제8천수집각조세포.관찰DC형태, 류식세포술(FCM)검측면역표형, RT-PCR검측CD1a표체, CCK-8검측T세포증식솔급살상솔.결과:식관암조직균장상청VEGF-A함량[(0.987±0.319) μg/L]명현고우암방[(0.152±0.105) μg/L, P<0.05]; 식관암균장상청조세포형태명현수도억제, CD86분자양성솔(%)여정상DC상비유69±8강위42±11、 CD1a유56±12강위27±12、 CD11c유21±13강위18±13(P<0.01), CD1a기인궤호무표체, 자격T세포증식솔(%)유112.5±7.2강위70.2±3.5(P<0.01), 살상솔(%)유62.4±0.6 강위46.8±1.6(P<0.01); 암방균장상청액조、 VEGF-A조결과여정상DC조무통계학의의.결론:식관암조직균장상청액소모의적미배경대DC적유도분화급기공능유명현적억제작용, 재해억제작용중VEGF-A병불기주요작용.
