中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
47期
9265-9269
,共5页
王小庆%胡承恒%伍贵富%杨燕华%何小洪%杜志民%刘东红
王小慶%鬍承恆%伍貴富%楊燕華%何小洪%杜誌民%劉東紅
왕소경%호승항%오귀부%양연화%하소홍%두지민%류동홍
脐血单个核细胞%心肌梗死%心功能%重构
臍血單箇覈細胞%心肌梗死%心功能%重構
제혈단개핵세포%심기경사%심공능%중구
背景:以往心肌梗死后心肌修复实验多集中于骨髓干细胞,甚少报道涉及富含造血干细胞、间充质干细胞及内皮祖细胞的脐血干细胞,而以其作为种了细胞的可行性及安全性尚未确定.目的:探讨人脐血单个核细胞移植对急性心肌梗死大鼠心功能和左室重构的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-11/2007-09在中山大学动物试验中心完成.材料:脐血来源于足月分娩的健康产妇,由中山大学附属第一医院产科提供.Wistar雄性大鼠45只,随机分为假手术组、模型组、细胞移植组,15只/组.方法:采用羟乙基淀粉沉淀联合ficoll-paque密度梯度离心法体外分离培养人脐血单个核细胞.移植前细胞行BrdU标记.模型组、细胞移植组大鼠结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死模型,造模成功后,细胞移植组在梗死区周边注射脐血单个核细胞悬液,模型组注射DMEM培养基,培养4周.假手术组仪开胸并在左前降支下过线.主要观察指标:通过超生心动图评价心脏结构,以左心导管检测血流动力学改变,采用苏木精-伊红染色、Masson染色和BrdU免疫组化染色观察心肌组织病理学变化、心肌胶原含量变化及移植细胞存活情况.结果:与模型组比较,细胞移植组左室壁厚度增加,室壁活动度明显改善,左室舒张末期内径缩小,球形指数增大,左室舒张未压显著下降,左室内压最大上升/下降速率明显增快,差异均有显著性意义(P<0.05).假手术组心肌细胞间仪见少量胶原纤维,呈条索状与心肌纤维平行排列:与模型组比较,细胞移植组心肌细胞肿胀程度及排列情况均有所改善,细胞移植组胶原容积分数明显降低(t=3.81,P=0.001).模型组梗死区及其周边和假手术组均未检测到BrdU阳性细胞,细胞移植组胞核呈BrdU阳性的细胞散在分布于梗死区,部分阳性细胞参与到血管壁的组成.结论:在未使用免疫抑制剂的条件下,人脐血单个核细胞可成功移植到大鼠心肌梗死区,且短期内具有改善心功能、抑制梗死后心肌重构的作用.
揹景:以往心肌梗死後心肌脩複實驗多集中于骨髓榦細胞,甚少報道涉及富含造血榦細胞、間充質榦細胞及內皮祖細胞的臍血榦細胞,而以其作為種瞭細胞的可行性及安全性尚未確定.目的:探討人臍血單箇覈細胞移植對急性心肌梗死大鼠心功能和左室重構的影響.設計、時間及地點:隨機對照動物實驗,于2005-11/2007-09在中山大學動物試驗中心完成.材料:臍血來源于足月分娩的健康產婦,由中山大學附屬第一醫院產科提供.Wistar雄性大鼠45隻,隨機分為假手術組、模型組、細胞移植組,15隻/組.方法:採用羥乙基澱粉沉澱聯閤ficoll-paque密度梯度離心法體外分離培養人臍血單箇覈細胞.移植前細胞行BrdU標記.模型組、細胞移植組大鼠結扎冠狀動脈左前降支建立急性心肌梗死模型,造模成功後,細胞移植組在梗死區週邊註射臍血單箇覈細胞懸液,模型組註射DMEM培養基,培養4週.假手術組儀開胸併在左前降支下過線.主要觀察指標:通過超生心動圖評價心髒結構,以左心導管檢測血流動力學改變,採用囌木精-伊紅染色、Masson染色和BrdU免疫組化染色觀察心肌組織病理學變化、心肌膠原含量變化及移植細胞存活情況.結果:與模型組比較,細胞移植組左室壁厚度增加,室壁活動度明顯改善,左室舒張末期內徑縮小,毬形指數增大,左室舒張未壓顯著下降,左室內壓最大上升/下降速率明顯增快,差異均有顯著性意義(P<0.05).假手術組心肌細胞間儀見少量膠原纖維,呈條索狀與心肌纖維平行排列:與模型組比較,細胞移植組心肌細胞腫脹程度及排列情況均有所改善,細胞移植組膠原容積分數明顯降低(t=3.81,P=0.001).模型組梗死區及其週邊和假手術組均未檢測到BrdU暘性細胞,細胞移植組胞覈呈BrdU暘性的細胞散在分佈于梗死區,部分暘性細胞參與到血管壁的組成.結論:在未使用免疫抑製劑的條件下,人臍血單箇覈細胞可成功移植到大鼠心肌梗死區,且短期內具有改善心功能、抑製梗死後心肌重構的作用.
배경:이왕심기경사후심기수복실험다집중우골수간세포,심소보도섭급부함조혈간세포、간충질간세포급내피조세포적제혈간세포,이이기작위충료세포적가행성급안전성상미학정.목적:탐토인제혈단개핵세포이식대급성심기경사대서심공능화좌실중구적영향.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2005-11/2007-09재중산대학동물시험중심완성.재료:제혈래원우족월분면적건강산부,유중산대학부속제일의원산과제공.Wistar웅성대서45지,수궤분위가수술조、모형조、세포이식조,15지/조.방법:채용간을기정분침정연합ficoll-paque밀도제도리심법체외분리배양인제혈단개핵세포.이식전세포행BrdU표기.모형조、세포이식조대서결찰관상동맥좌전강지건립급성심기경사모형,조모성공후,세포이식조재경사구주변주사제혈단개핵세포현액,모형조주사DMEM배양기,배양4주.가수술조의개흉병재좌전강지하과선.주요관찰지표:통과초생심동도평개심장결구,이좌심도관검측혈류동역학개변,채용소목정-이홍염색、Masson염색화BrdU면역조화염색관찰심기조직병이학변화、심기효원함량변화급이식세포존활정황.결과:여모형조비교,세포이식조좌실벽후도증가,실벽활동도명현개선,좌실서장말기내경축소,구형지수증대,좌실서장미압현저하강,좌실내압최대상승/하강속솔명현증쾌,차이균유현저성의의(P<0.05).가수술조심기세포간의견소량효원섬유,정조색상여심기섬유평행배렬:여모형조비교,세포이식조심기세포종창정도급배렬정황균유소개선,세포이식조효원용적분수명현강저(t=3.81,P=0.001).모형조경사구급기주변화가수술조균미검측도BrdU양성세포,세포이식조포핵정BrdU양성적세포산재분포우경사구,부분양성세포삼여도혈관벽적조성.결론:재미사용면역억제제적조건하,인제혈단개핵세포가성공이식도대서심기경사구,차단기내구유개선심공능、억제경사후심기중구적작용.