CAJ | 학술논문

甲胎蛋白(AFP)在胎肝中高表达,出生后不久就快速下调至很低水平.有关肝脏AFP基因出生后的转录抑制机制一直是未解之谜.AFP基因的增强子、抑制区域和启动子等顺式调控元件可能参与其转录抑制的调节,但有关的关键性转录抑制因子尚不明确.我们发现了一种新型锌指蛋白ZBTB20,为研究其体内的生理功能,我们利用条件打靶技术,建立了ZBTB20的组织特异性基因敲除小鼠模型,发现肝细胞特异性ZBTB20基因敲除小鼠出生后的肝脏AFP基因一直维持近乎胎肝的高水平表达,而其肝细胞处于正常的静息状态.生化分析显示,ZBTB20具有转录抑制活性,体外可有效抑制AFP启动子的转录活性;染色质免疫沉淀和EMSA实验结果显示ZBTB20 体内和体外能直接结合AFP启动子.在小鼠肝脏的发育过程中,ZBTB20基因被渐进激活,与AFP基因的表达水平呈负相关,提示激活的ZBTB20参与了AFP基因的转录抑制.上述结果表明ZBTB20是调控AFP基因表达的关键转录因子,由此我们认为肝脏ZBTB20基因出生后的表达上调及其发挥的转录抑制作用是导致AFP基因出生后快速下调的主要原因.
갑태단백(AFP)재태간중고표체,출생후불구취쾌속하조지흔저수평.유관간장AFP기인출생후적전록억제궤제일직시미해지미.AFP기인적증강자、억제구역화계동자등순식조공원건가능삼여기전록억제적조절,단유관적관건성전록억제인자상불명학.아문발현료일충신형자지단백ZBTB20,위연구기체내적생리공능,아문이용조건타파기술,건립료ZBTB20적조직특이성기인고제소서모형,발현간세포특이성ZBTB20기인고제소서출생후적간장AFP기인일직유지근호태간적고수평표체,이기간세포처우정상적정식상태.생화분석현시,ZBTB20구유전록억제활성,체외가유효억제AFP계동자적전록활성;염색질면역침정화EMSA실험결과현시ZBTB20 체내화체외능직접결합AFP계동자.재소서간장적발육과정중,ZBTB20기인피점진격활,여AFP기인적표체수평정부상관,제시격활적ZBTB20삼여료AFP기인적전록억제.상술결과표명ZBTB20시조공AFP기인표체적관건전록인자,유차아문인위간장ZBTB20기인출생후적표체상조급기발휘적전록억제작용시도치AFP기인출생후쾌속하조적주요원인.