CAJ | 학술논문

[目的]采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,克隆朗德鹅肌肉生成抑制因子基因(MSTN),研究MSTN基因表达和日粮能量及其部分血清激素含量的相互关系,了解MSTN的功能,为水禽分子营养和分子育种提供基础资料.[方法]从朗德鹅(Anser anser)的腿肌中抽提总RNA,用两步法RT-PCR扩增出MSTN基因的cDNA编码序列,以pGEM-T Vector为载体,将该片段克隆到大肠杆菌(Bscherichia coli)中.通过筛选阳性克隆,双酶切鉴定后测序;以MSTN基因的克隆为基础,以β-actin为内标,构建优化的半定量RT-PCR方法,研究高中低(A:13.38MJ·kg-1、B:12.13MJ·kg-1、C:10.87MJ·kg-1)3种不同能量对朗德鹅21日龄和70日龄2个时期,肌肉组织MSTN基因表达的差异;同时用放免法测定21、70日龄的血清GH和IGF-I浓度.[结果]克隆朗德鹅MSTN基因cDNA的部分序列,其片段大小为1128bp,编码375个氨基酸组成的多肽,与已发表的鸡、鸭、鹅的MSTN核苷酸相似性分别为94%,94%、99%;氨基酸的相似性分别为98%、97%、98%;21日龄时,朗德鹅公鹅、母鹅MSTN表达量差异不显著;70日龄时朗德鹅公鹅MSTN的表达量情况为能量ACB,朗德鹅母鹅MSTN的表达量情况为CBA;对于朗德鹅21～70日龄阶段的生长,MSTN基因的表达量和血清IGF-I的变化基本一致;与血清GH含量之间并不存在很大关联,GH和能量的高低呈正相关.[结论]日粮能量对21日龄后朗德鹅MSTN基因的表达有影响,且MSTN基因表达量和血清IGF-I具有相关性,和血清GH无较大相关性.
[목적]채용반전록-취합매련반응(RT-PCR)기술,극륭랑덕아기육생성억제인자기인(MSTN),연구MSTN기인표체화일량능량급기부분혈청격소함량적상호관계,료해MSTN적공능,위수금분자영양화분자육충제공기출자료.[방법]종랑덕아(Anser anser)적퇴기중추제총RNA,용량보법RT-PCR확증출MSTN기인적cDNA편마서렬,이pGEM-T Vector위재체,장해편단극륭도대장간균(Bscherichia coli)중.통과사선양성극륭,쌍매절감정후측서;이MSTN기인적극륭위기출,이β-actin위내표,구건우화적반정량RT-PCR방법,연구고중저(A:13.38MJ·kg-1、B:12.13MJ·kg-1、C:10.87MJ·kg-1)3충불동능량대랑덕아21일령화70일령2개시기,기육조직MSTN기인표체적차이;동시용방면법측정21、70일령적혈청GH화IGF-I농도.[결과]극륭랑덕아MSTN기인cDNA적부분서렬,기편단대소위1128bp,편마375개안기산조성적다태,여이발표적계、압、아적MSTN핵감산상사성분별위94%,94%、99%;안기산적상사성분별위98%、97%、98%;21일령시,랑덕아공아、모아MSTN표체량차이불현저;70일령시랑덕아공아MSTN적표체량정황위능량ACB,랑덕아모아MSTN적표체량정황위CBA;대우랑덕아21～70일령계단적생장,MSTN기인적표체량화혈청IGF-I적변화기본일치;여혈청GH함량지간병불존재흔대관련,GH화능량적고저정정상관.[결론]일량능량대21일령후랑덕아MSTN기인적표체유영향,차MSTN기인표체량화혈청IGF-I구유상관성,화혈청GH무교대상관성.