河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
2期
99-102
,共4页
张红%王健%李姣%易明林%韩鸿鹏%张改平
張紅%王健%李姣%易明林%韓鴻鵬%張改平
장홍%왕건%리교%역명림%한홍붕%장개평
鸡Igλ轻链信号肽%小鼠纤溶酶原信号肽%绿色荧光蛋白%分泌表达
鷄Igλ輕鏈信號肽%小鼠纖溶酶原信號肽%綠色熒光蛋白%分泌錶達
계Igλ경련신호태%소서섬용매원신호태%록색형광단백%분비표체
分别将鸡 Igλ轻链信号肽、小鼠纤溶酶原信号肽与 pEGFP-C1 载体的绿色荧光蛋白 N 端融合,产生带有信号肽的中间裁体 pEGFP-SPc 和 pEGFP-SPm.对鸡 Igλ轻链基因的定向克隆,构建了带有纯化标签的鸡 Igλ轻链绿色荧光蛋白真核表达栽体 pEGFP-SPc-λ和 pEGFP-SPm-λ.转染 COS7细胞后,荧光显微镜观察及 Western blotting 检测融合蛋白的分泌表达,结果显示,鸡 Igλ轻链信号肤能引导鸡 Igλ轻链绿色荧光蛋白融合分子的分泌表达;而小鼠纤溶酶原信号肽不具备引导该重组蛋白分泌表达的功能.表明信号肽在蛋白分泌表达中的关键作用,重组蛋白的分泌表达要选择合适的信号肽.
分彆將鷄 Igλ輕鏈信號肽、小鼠纖溶酶原信號肽與 pEGFP-C1 載體的綠色熒光蛋白 N 耑融閤,產生帶有信號肽的中間裁體 pEGFP-SPc 和 pEGFP-SPm.對鷄 Igλ輕鏈基因的定嚮剋隆,構建瞭帶有純化標籤的鷄 Igλ輕鏈綠色熒光蛋白真覈錶達栽體 pEGFP-SPc-λ和 pEGFP-SPm-λ.轉染 COS7細胞後,熒光顯微鏡觀察及 Western blotting 檢測融閤蛋白的分泌錶達,結果顯示,鷄 Igλ輕鏈信號膚能引導鷄 Igλ輕鏈綠色熒光蛋白融閤分子的分泌錶達;而小鼠纖溶酶原信號肽不具備引導該重組蛋白分泌錶達的功能.錶明信號肽在蛋白分泌錶達中的關鍵作用,重組蛋白的分泌錶達要選擇閤適的信號肽.
분별장계 Igλ경련신호태、소서섬용매원신호태여 pEGFP-C1 재체적록색형광단백 N 단융합,산생대유신호태적중간재체 pEGFP-SPc 화 pEGFP-SPm.대계 Igλ경련기인적정향극륭,구건료대유순화표첨적계 Igλ경련록색형광단백진핵표체재체 pEGFP-SPc-λ화 pEGFP-SPm-λ.전염 COS7세포후,형광현미경관찰급 Western blotting 검측융합단백적분비표체,결과현시,계 Igλ경련신호부능인도계 Igλ경련록색형광단백융합분자적분비표체;이소서섬용매원신호태불구비인도해중조단백분비표체적공능.표명신호태재단백분비표체중적관건작용,중조단백적분비표체요선택합괄적신호태.
