中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
49期
9937-9940
,共4页
张月红%金宏%许志勤%南文考%王先远%薛长勇%高兰兴
張月紅%金宏%許誌勤%南文攷%王先遠%薛長勇%高蘭興
장월홍%금굉%허지근%남문고%왕선원%설장용%고란흥
染料木黄酮%成骨细胞%转化生长因子β
染料木黃酮%成骨細胞%轉化生長因子β
염료목황동%성골세포%전화생장인자β
目的:动物实验、临床研究以及流行病学调查表明染料木黄酮可预防骨质疏松的发生,但其具体机制尚不清楚.观察染料木黄酮对成骨细胞活性的影响及其与转化生长因子β的关系.方法:实验于2001-05/2003-05在卫生学环境医学研究所生化实验室完成.①实验材料:选择出生3 d的Wistar大鼠,体质量(10±2)g.②实验方法:无菌条件下分离颅盖骨,剪碎,加入胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶,用含体积分数为0.1胎牛血清的F-12培养基重悬,调整细胞浓度后接种于25mL培养瓶中,Ⅱ代细胞用于实验.实验分为染料木黄酮组、雌激素组和对照组(吐温20),染料木黄酮组浓度分别为0.1,1,10 μmol/L,雌激素组的浓度分别为0.1,1 nmol/L.③实验评估:培养48,72 h应用四甲基偶氮唑盐测定成骨细胞增殖;培养48 h3H-胸腺嘧啶掺入实验测定DNA合成;免疫组织化学方法观察转化生长因子β的表达.结果:①染料木黄酮对成骨胞增殖的影响:与对照组相比,培养48 h后0.1,1,10 μmol/L染料木黄酮四甲基偶氮唑盐的吸光度值分别增加1.43,1.36,1.05倍;0.1,1 nmol/L雌激素组分别增加1.00倍和0.84倍;培养72 h,染料木黄酮3个浓度组分别增加1.46,1.13倍和0.93倍,雌激素组分别增加2.26倍和2.30倍;各组与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05).②3H-胸腺嘧啶掺入实验:0.1,1,10 μmol/L染料木黄酮3H-胸腺嘧啶掺入量分别比对照组增加6.45,11.29,0.47倍;0.1,1 nmol/L雌激素组增加16.5倍和15.4倍,各组与对照组相比差异均有显著性(P＜0.05).③成骨细胞转化生长因子β的表达:各组成骨细胞周围均有较强的呈棕色的阳性颗粒,但染料木黄酮组与对照组相比差异无显著性(P＞0.05).结论:不同浓度染料木黄酮和雌激素一样可以促进成骨细胞增殖和DNA合成,但染料木黄酮不是通过影响转化生长因子β的表达来促进成骨细胞增殖与分化,详细机制还需进一步研究.
目的:動物實驗、臨床研究以及流行病學調查錶明染料木黃酮可預防骨質疏鬆的髮生,但其具體機製尚不清楚.觀察染料木黃酮對成骨細胞活性的影響及其與轉化生長因子β的關繫.方法:實驗于2001-05/2003-05在衛生學環境醫學研究所生化實驗室完成.①實驗材料:選擇齣生3 d的Wistar大鼠,體質量(10±2)g.②實驗方法:無菌條件下分離顱蓋骨,剪碎,加入胰蛋白酶和Ⅱ型膠原酶,用含體積分數為0.1胎牛血清的F-12培養基重懸,調整細胞濃度後接種于25mL培養瓶中,Ⅱ代細胞用于實驗.實驗分為染料木黃酮組、雌激素組和對照組(吐溫20),染料木黃酮組濃度分彆為0.1,1,10 μmol/L,雌激素組的濃度分彆為0.1,1 nmol/L.③實驗評估:培養48,72 h應用四甲基偶氮唑鹽測定成骨細胞增殖;培養48 h3H-胸腺嘧啶摻入實驗測定DNA閤成;免疫組織化學方法觀察轉化生長因子β的錶達.結果:①染料木黃酮對成骨胞增殖的影響:與對照組相比,培養48 h後0.1,1,10 μmol/L染料木黃酮四甲基偶氮唑鹽的吸光度值分彆增加1.43,1.36,1.05倍;0.1,1 nmol/L雌激素組分彆增加1.00倍和0.84倍;培養72 h,染料木黃酮3箇濃度組分彆增加1.46,1.13倍和0.93倍,雌激素組分彆增加2.26倍和2.30倍;各組與對照組相比差異均有顯著性(P＜0.05).②3H-胸腺嘧啶摻入實驗:0.1,1,10 μmol/L染料木黃酮3H-胸腺嘧啶摻入量分彆比對照組增加6.45,11.29,0.47倍;0.1,1 nmol/L雌激素組增加16.5倍和15.4倍,各組與對照組相比差異均有顯著性(P＜0.05).③成骨細胞轉化生長因子β的錶達:各組成骨細胞週圍均有較彊的呈棕色的暘性顆粒,但染料木黃酮組與對照組相比差異無顯著性(P＞0.05).結論:不同濃度染料木黃酮和雌激素一樣可以促進成骨細胞增殖和DNA閤成,但染料木黃酮不是通過影響轉化生長因子β的錶達來促進成骨細胞增殖與分化,詳細機製還需進一步研究.
목적:동물실험、림상연구이급류행병학조사표명염료목황동가예방골질소송적발생,단기구체궤제상불청초.관찰염료목황동대성골세포활성적영향급기여전화생장인자β적관계.방법:실험우2001-05/2003-05재위생학배경의학연구소생화실험실완성.①실험재료:선택출생3 d적Wistar대서,체질량(10±2)g.②실험방법:무균조건하분리로개골,전쇄,가입이단백매화Ⅱ형효원매,용함체적분수위0.1태우혈청적F-12배양기중현,조정세포농도후접충우25mL배양병중,Ⅱ대세포용우실험.실험분위염료목황동조、자격소조화대조조(토온20),염료목황동조농도분별위0.1,1,10 μmol/L,자격소조적농도분별위0.1,1 nmol/L.③실험평고:배양48,72 h응용사갑기우담서염측정성골세포증식;배양48 h3H-흉선밀정참입실험측정DNA합성;면역조직화학방법관찰전화생장인자β적표체.결과:①염료목황동대성골포증식적영향:여대조조상비,배양48 h후0.1,1,10 μmol/L염료목황동사갑기우담서염적흡광도치분별증가1.43,1.36,1.05배;0.1,1 nmol/L자격소조분별증가1.00배화0.84배;배양72 h,염료목황동3개농도조분별증가1.46,1.13배화0.93배,자격소조분별증가2.26배화2.30배;각조여대조조상비차이균유현저성(P＜0.05).②3H-흉선밀정참입실험:0.1,1,10 μmol/L염료목황동3H-흉선밀정참입량분별비대조조증가6.45,11.29,0.47배;0.1,1 nmol/L자격소조증가16.5배화15.4배,각조여대조조상비차이균유현저성(P＜0.05).③성골세포전화생장인자β적표체:각조성골세포주위균유교강적정종색적양성과립,단염료목황동조여대조조상비차이무현저성(P＞0.05).결론:불동농도염료목황동화자격소일양가이촉진성골세포증식화DNA합성,단염료목황동불시통과영향전화생장인자β적표체래촉진성골세포증식여분화,상세궤제환수진일보연구.
