华西口腔医学杂志
華西口腔醫學雜誌
화서구강의학잡지
WEST CHINA JOURNAL OF STOMATOLOGY
2007年
6期
584-587
,共4页
臧光祥%穆亚冰%孙宏晨%刘金钟%张泽兵%柯小亮%苗雷英
臧光祥%穆亞冰%孫宏晨%劉金鐘%張澤兵%柯小亮%苗雷英
장광상%목아빙%손굉신%류금종%장택병%가소량%묘뢰영
鳞状细胞癌%腺病毒%凋亡基因%基因治疗
鱗狀細胞癌%腺病毒%凋亡基因%基因治療
린상세포암%선병독%조망기인%기인치료
目的 探讨以凋亡基因TRAIL为靶基因,腺病毒(Ad)为载体.巨细胞病毒启动子(CMV)为启动子的重组基因治疗药物AdCMV-TRAIL诱导鳞状细胞癌细胞系TCa83凋亡的作用.方法 用重组绿色荧光蛋白基因(EGFP)的腺病毒AdCMV-EGFP为对照组,转染TCa83细胞确定重组腺病毒的转染率.在细胞转染l、3、5、7 d时,应用荧光倒置显微镜观察细胞形态,应用MTT检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率.以AdCMV-TRAIL为实验组转染TCa83细胞,采用RT-PCR方法检测细胞TRAIL的表达.结果 AdCMV-EGFP在1000 particles/cell时转染率为100%.细胞转染AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP后,随时间延长细胞存活率逐渐下降,但AdCMV-TRAIL组较AdCMV-EGFP组下降更快(P＜0.001).AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能诱导TCa83细胞凋亡,而AdCMV-TRAIL组引起细胞凋亡的程度明显比AdCMV-EGFP组大(P＜0.0001).通过RT-PCR可检测到594 bp的TRAIL基因.结论 AdCMV-TRAIL在体外能抑TCa83细胞的活性,并能促进其凋亡.
目的 探討以凋亡基因TRAIL為靶基因,腺病毒(Ad)為載體.巨細胞病毒啟動子(CMV)為啟動子的重組基因治療藥物AdCMV-TRAIL誘導鱗狀細胞癌細胞繫TCa83凋亡的作用.方法 用重組綠色熒光蛋白基因(EGFP)的腺病毒AdCMV-EGFP為對照組,轉染TCa83細胞確定重組腺病毒的轉染率.在細胞轉染l、3、5、7 d時,應用熒光倒置顯微鏡觀察細胞形態,應用MTT檢測細胞的存活率,流式細胞儀檢測細胞凋亡率.以AdCMV-TRAIL為實驗組轉染TCa83細胞,採用RT-PCR方法檢測細胞TRAIL的錶達.結果 AdCMV-EGFP在1000 particles/cell時轉染率為100%.細胞轉染AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP後,隨時間延長細胞存活率逐漸下降,但AdCMV-TRAIL組較AdCMV-EGFP組下降更快(P＜0.001).AdCMV-TRAIL和AdCMV-EGFP均能誘導TCa83細胞凋亡,而AdCMV-TRAIL組引起細胞凋亡的程度明顯比AdCMV-EGFP組大(P＜0.0001).通過RT-PCR可檢測到594 bp的TRAIL基因.結論 AdCMV-TRAIL在體外能抑TCa83細胞的活性,併能促進其凋亡.
목적 탐토이조망기인TRAIL위파기인,선병독(Ad)위재체.거세포병독계동자(CMV)위계동자적중조기인치료약물AdCMV-TRAIL유도린상세포암세포계TCa83조망적작용.방법 용중조록색형광단백기인(EGFP)적선병독AdCMV-EGFP위대조조,전염TCa83세포학정중조선병독적전염솔.재세포전염l、3、5、7 d시,응용형광도치현미경관찰세포형태,응용MTT검측세포적존활솔,류식세포의검측세포조망솔.이AdCMV-TRAIL위실험조전염TCa83세포,채용RT-PCR방법검측세포TRAIL적표체.결과 AdCMV-EGFP재1000 particles/cell시전염솔위100%.세포전염AdCMV-TRAIL화AdCMV-EGFP후,수시간연장세포존활솔축점하강,단AdCMV-TRAIL조교AdCMV-EGFP조하강경쾌(P＜0.001).AdCMV-TRAIL화AdCMV-EGFP균능유도TCa83세포조망,이AdCMV-TRAIL조인기세포조망적정도명현비AdCMV-EGFP조대(P＜0.0001).통과RT-PCR가검측도594 bp적TRAIL기인.결론 AdCMV-TRAIL재체외능억TCa83세포적활성,병능촉진기조망.
