棉花学报
棉花學報
면화학보
COTTON SCIENCE
2007年
6期
419-423
,共5页
于晓玲%崔百明%卫海滨%赵平娟%彭明
于曉玲%崔百明%衛海濱%趙平娟%彭明
우효령%최백명%위해빈%조평연%팽명
棉纤维%基因枪%瞬时表达%GUS
棉纖維%基因鎗%瞬時錶達%GUS
면섬유%기인창%순시표체%GUS
试验运用了0 d,1 d的棉胚珠为受体,GUS基因为报告基因,用基因枪直接对胚珠表皮细胞进行轰击.整个表达载体包括两个部分,第一部分是由CaMV35S调控的GUS基因,第二部分是由棉纤维特异表达启动子(RDL1)调控的目标基因,因此目标基因与GUS报告基因能在同一个单纤维细胞中同时表达,从而提供了一个直观的在单纤维细胞中验证目标基因的表达与纤维发育关系的方法.研究中对受体棉花胚珠的发育时间、基因枪的轰击压力、轰击距离及轰击次数等影响转化效率的因素进行了分析优化.结果表明,最佳的转化组合条件是:以开花一天的棉花胚珠为受体,当轰击压力为1100 psi,轰击距离为9 cm,轰击次数为2次时可达到最高的转化率,并能观察到稳定的GUS表达.
試驗運用瞭0 d,1 d的棉胚珠為受體,GUS基因為報告基因,用基因鎗直接對胚珠錶皮細胞進行轟擊.整箇錶達載體包括兩箇部分,第一部分是由CaMV35S調控的GUS基因,第二部分是由棉纖維特異錶達啟動子(RDL1)調控的目標基因,因此目標基因與GUS報告基因能在同一箇單纖維細胞中同時錶達,從而提供瞭一箇直觀的在單纖維細胞中驗證目標基因的錶達與纖維髮育關繫的方法.研究中對受體棉花胚珠的髮育時間、基因鎗的轟擊壓力、轟擊距離及轟擊次數等影響轉化效率的因素進行瞭分析優化.結果錶明,最佳的轉化組閤條件是:以開花一天的棉花胚珠為受體,噹轟擊壓力為1100 psi,轟擊距離為9 cm,轟擊次數為2次時可達到最高的轉化率,併能觀察到穩定的GUS錶達.
시험운용료0 d,1 d적면배주위수체,GUS기인위보고기인,용기인창직접대배주표피세포진행굉격.정개표체재체포괄량개부분,제일부분시유CaMV35S조공적GUS기인,제이부분시유면섬유특이표체계동자(RDL1)조공적목표기인,인차목표기인여GUS보고기인능재동일개단섬유세포중동시표체,종이제공료일개직관적재단섬유세포중험증목표기인적표체여섬유발육관계적방법.연구중대수체면화배주적발육시간、기인창적굉격압력、굉격거리급굉격차수등영향전화효솔적인소진행료분석우화.결과표명,최가적전화조합조건시:이개화일천적면화배주위수체,당굉격압력위1100 psi,굉격거리위9 cm,굉격차수위2차시가체도최고적전화솔,병능관찰도은정적GUS표체.