生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
16-18
,共3页
应莲芳%雷清%梁凌宇%高雪峰%蒋琳
應蓮芳%雷清%樑凌宇%高雪峰%蔣琳
응련방%뢰청%량릉우%고설봉%장림
睫状神经营养因子(CNTF)%突变体%基因表达%生物活性%减肥
睫狀神經營養因子(CNTF)%突變體%基因錶達%生物活性%減肥
첩상신경영양인자(CNTF)%돌변체%기인표체%생물활성%감비
目的:通过对原始CNTF的突变改造,降低表达蛋白的免疫原性,同时增加其稳定性,以期能用于临床治疗肥胖症.方法:以原始CNTF为模板,去掉N端的12个氨基酸、C端的14个氨基酸,并将C端末2个氨基酸点突变为极性较强的赖氨酸,在大肠杆菌中表达,获得CNTF-T突变体.结果:基因序列分析与原设计吻合,目的蛋白表达量占全菌体的35%左右,表达蛋白以包涵体形式存在,经变性、复性、DEAE-FF纯化,纯度可达95%以上,小鼠体内生物活性测定,能明显抑制小鼠体重增长,且CNTF-T的生物活性比原始序列CNTF的活性高.结论:突变的CNTF-T有望成为新一代的生物减肥制剂应用于临床.
目的:通過對原始CNTF的突變改造,降低錶達蛋白的免疫原性,同時增加其穩定性,以期能用于臨床治療肥胖癥.方法:以原始CNTF為模闆,去掉N耑的12箇氨基痠、C耑的14箇氨基痠,併將C耑末2箇氨基痠點突變為極性較彊的賴氨痠,在大腸桿菌中錶達,穫得CNTF-T突變體.結果:基因序列分析與原設計吻閤,目的蛋白錶達量佔全菌體的35%左右,錶達蛋白以包涵體形式存在,經變性、複性、DEAE-FF純化,純度可達95%以上,小鼠體內生物活性測定,能明顯抑製小鼠體重增長,且CNTF-T的生物活性比原始序列CNTF的活性高.結論:突變的CNTF-T有望成為新一代的生物減肥製劑應用于臨床.
목적:통과대원시CNTF적돌변개조,강저표체단백적면역원성,동시증가기은정성,이기능용우림상치료비반증.방법:이원시CNTF위모판,거도N단적12개안기산、C단적14개안기산,병장C단말2개안기산점돌변위겁성교강적뢰안산,재대장간균중표체,획득CNTF-T돌변체.결과:기인서렬분석여원설계문합,목적단백표체량점전균체적35%좌우,표체단백이포함체형식존재,경변성、복성、DEAE-FF순화,순도가체95%이상,소서체내생물활성측정,능명현억제소서체중증장,차CNTF-T적생물활성비원시서렬CNTF적활성고.결론:돌변적CNTF-T유망성위신일대적생물감비제제응용우림상.
