医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2007年
4期
315-318,323
,共5页
马涛%雷延昌%郝友华%王宝菊%杨东亮
馬濤%雷延昌%郝友華%王寶菊%楊東亮
마도%뢰연창%학우화%왕보국%양동량
APOBEC3F%克隆%真核表达%抗HBV效应
APOBEC3F%剋隆%真覈錶達%抗HBV效應
APOBEC3F%극륭%진핵표체%항HBV효응
目的 克隆、体外真核表达载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3F(APOBEC3F)基因并研究其抗病毒效应.方法 应用RT-PCR的方法从人PBMC细胞中扩增APOBEC3F基因,构建HA-APOBEC3F融合蛋白真核表达载体pXFA3F,pXFA3F和具有复制能力的1.3倍HBV载体pHBV1.3共转染HepG2细胞,Western印迹检测APOBEC3F融合蛋白在HepG2细胞中的表达,ELISA方法检测细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg水平,实时定量PCR检测HBV相关mRNA水平变化.结果 克隆了APOBEC3F基因,其经测序与GeneBank公布序列一致;构建的APOBEC3F真核表达载体pXFA3F经转染可在HepG2细胞中瞬时表达;APOBEC3F可抑制乙型肝炎表面抗原和e抗原的分泌,可使转染细胞内HBV相关mRNA水平下降.结论 成功克隆并真核表达了APOBEC3F基因,其在体外具有抗HBV生物学效应.
目的 剋隆、體外真覈錶達載脂蛋白B mRNA編輯酶催化多肽樣3F(APOBEC3F)基因併研究其抗病毒效應.方法 應用RT-PCR的方法從人PBMC細胞中擴增APOBEC3F基因,構建HA-APOBEC3F融閤蛋白真覈錶達載體pXFA3F,pXFA3F和具有複製能力的1.3倍HBV載體pHBV1.3共轉染HepG2細胞,Western印跡檢測APOBEC3F融閤蛋白在HepG2細胞中的錶達,ELISA方法檢測細胞培養上清液中的HBsAg和HBeAg水平,實時定量PCR檢測HBV相關mRNA水平變化.結果 剋隆瞭APOBEC3F基因,其經測序與GeneBank公佈序列一緻;構建的APOBEC3F真覈錶達載體pXFA3F經轉染可在HepG2細胞中瞬時錶達;APOBEC3F可抑製乙型肝炎錶麵抗原和e抗原的分泌,可使轉染細胞內HBV相關mRNA水平下降.結論 成功剋隆併真覈錶達瞭APOBEC3F基因,其在體外具有抗HBV生物學效應.
목적 극륭、체외진핵표체재지단백B mRNA편집매최화다태양3F(APOBEC3F)기인병연구기항병독효응.방법 응용RT-PCR적방법종인PBMC세포중확증APOBEC3F기인,구건HA-APOBEC3F융합단백진핵표체재체pXFA3F,pXFA3F화구유복제능력적1.3배HBV재체pHBV1.3공전염HepG2세포,Western인적검측APOBEC3F융합단백재HepG2세포중적표체,ELISA방법검측세포배양상청액중적HBsAg화HBeAg수평,실시정량PCR검측HBV상관mRNA수평변화.결과 극륭료APOBEC3F기인,기경측서여GeneBank공포서렬일치;구건적APOBEC3F진핵표체재체pXFA3F경전염가재HepG2세포중순시표체;APOBEC3F가억제을형간염표면항원화e항원적분비,가사전염세포내HBV상관mRNA수평하강.결론 성공극륭병진핵표체료APOBEC3F기인,기재체외구유항HBV생물학효응.
