环境科学研究
環境科學研究
배경과학연구
RSEARCH OF ENUIRONMENTAL SCIENCES
2007年
2期
89-93
,共5页
刘永军%张崇淼%王晓昌%孙茵%薛小平
劉永軍%張崇淼%王曉昌%孫茵%薛小平
류영군%장숭묘%왕효창%손인%설소평
通用引物%病原菌%聚合酶链式反应(PCR)%地表水
通用引物%病原菌%聚閤酶鏈式反應(PCR)%地錶水
통용인물%병원균%취합매련식반응(PCR)%지표수
为了探索通用引物PCR方法在地表水病原细菌检测中的应用价值,利用16S rRNA基因的高度保守性,设计并合成细菌的通用引物,采用合成的引物扩增参考菌株及西安市区不同地表水样,并对PCR产物分别进行序列测定及序列同源性分析,同时检测水样中的细菌总数和粪大肠杆菌浓度.结果显示,通用引物扩增4种参考菌株,320 bp处均可得到清晰的电泳条带,其特异性通过序列测定及同源性分析得到进一步验证;通用引物PCB可检出250 ng/L的埃希氏大肠杆菌标准菌株DNA,其PCR检测的灵敏度可达0.275 CFU/mL;用通用引物对西安市区不同地表水样进行PCR扩增,其中浐河、兴庆湖、大唐芙蓉园北湖、北石桥污水处理厂出水样品320 bp处都得到了清晰的电泳条带,而黑河水样没有条带;与之相对应的粪大肠杆菌群检测结果显示,只有北石桥污水处理厂出水和兴庆湖水样有粪大肠杆菌检出.
為瞭探索通用引物PCR方法在地錶水病原細菌檢測中的應用價值,利用16S rRNA基因的高度保守性,設計併閤成細菌的通用引物,採用閤成的引物擴增參攷菌株及西安市區不同地錶水樣,併對PCR產物分彆進行序列測定及序列同源性分析,同時檢測水樣中的細菌總數和糞大腸桿菌濃度.結果顯示,通用引物擴增4種參攷菌株,320 bp處均可得到清晰的電泳條帶,其特異性通過序列測定及同源性分析得到進一步驗證;通用引物PCB可檢齣250 ng/L的埃希氏大腸桿菌標準菌株DNA,其PCR檢測的靈敏度可達0.275 CFU/mL;用通用引物對西安市區不同地錶水樣進行PCR擴增,其中浐河、興慶湖、大唐芙蓉園北湖、北石橋汙水處理廠齣水樣品320 bp處都得到瞭清晰的電泳條帶,而黑河水樣沒有條帶;與之相對應的糞大腸桿菌群檢測結果顯示,隻有北石橋汙水處理廠齣水和興慶湖水樣有糞大腸桿菌檢齣.
위료탐색통용인물PCR방법재지표수병원세균검측중적응용개치,이용16S rRNA기인적고도보수성,설계병합성세균적통용인물,채용합성적인물확증삼고균주급서안시구불동지표수양,병대PCR산물분별진행서렬측정급서렬동원성분석,동시검측수양중적세균총수화분대장간균농도.결과현시,통용인물확증4충삼고균주,320 bp처균가득도청석적전영조대,기특이성통과서렬측정급동원성분석득도진일보험증;통용인물PCB가검출250 ng/L적애희씨대장간균표준균주DNA,기PCR검측적령민도가체0.275 CFU/mL;용통용인물대서안시구불동지표수양진행PCR확증,기중산하、흥경호、대당부용완북호、북석교오수처리엄출수양품320 bp처도득도료청석적전영조대,이흑하수양몰유조대;여지상대응적분대장간균군검측결과현시,지유북석교오수처리엄출수화흥경호수양유분대장간균검출.
