CAJ | 학술논문

目的:分析结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子和血清一氧化氮在慢性酒精性肝病大鼠的表达状况及丹芪保肝汤对慢性酒精性肝病的影响.方法:实验于2004-04/11在中国医科大学实验动物部及中心实验室完成.Wistar大鼠96只,随机分为3组:正常对照组(n=25),酒精性肝病模型组(n=38),丹芪保肝汤防治组(n=33).酒精性肝病模型组用梯度酒精定量灌胃的方法制备酒精性肝病模型,丹芪保肝汤防治组造模同时给予丹芪保肝汤口服;正常对照组动物给予相同容积的生理盐水,于开始灌胃4、8、12周末分别处死酒精性肝病模型组12、16、10只大鼠,丹芪保肝汤防治组10、14、9只及正常对照组动物9、8、8只大鼠,下腔静脉取血,经心脏灌流固定,取肝组织-70℃保存.分离血清,-20℃保存.取肝组织作苏木精-伊红染色显示变性、坏死状况,免疫组化检测肝内结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子表达,采用硝酸还原酶法检测血清一氧化氮含量.结果:各组实验动物全部进入结果分析,如有因为起初呛咳窒息和酒精的耐受性差的及时补充.①各组大鼠一般情况:酒精性肝病模型组大鼠同正常对照组相比,一般状态差,毛色无光泽,易激惹,体质量减轻(P＜0.01),丹芪保肝汤防治组与酒精性肝病模型组体质量相比差异显著(P＜0.01).②肝脏组织病理学改变光镜下观察结果:正常对照组肝细胞以中央静脉为中心向外周呈放射状分布;酒精灌胃4周末,局限性肝小叶中央静脉区脂肪变性及空泡变性小于1/3,肝细胞点片状坏死,炎细胞浸润;8周末,肝小叶中央静脉区脂肪及空泡变性明显增多且小于2/3,肝细胞呈大片状坏死;12周末,大于2/3肝小叶形成弥漫性以大空泡变性为主的混合性脂肪变,肝细胞坏死增多.③肝组织结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子免疫组化染色结果:酒精性肝病模型组、丹芪保肝汤防治组与正常对照组相比,肝脏结缔组织生长因子的胞浆、肿瘤坏死因子的胞质的表达均明显增加(P＜0.01),酒精性肝病模型组与丹芪保肝汤防治组相比亦有显著差异(P＜0.05);随着乙醇刺激时间的延长和剂量的不断加大,各酒精性肝病模型组及丹芪保肝汤防治组之间肝脏结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子的表达也逐渐增加(P＜0.01).④各组大鼠血清一氧化氮水平:丹芪保肝汤防治组与酒精性肝病模型组血清一氧化氮水平在4周、8周、12周逐渐升高,各组内比较有统计学差异(P＜0.05);酒精性肝病模型组、丹芪保肝汤防治组分别与正常对照组比较有统计学差异(P＜0.05).与酒精性肝病模型组相比,丹芪保肝汤防治组能有效抑制结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子表达,降低血清一氧化氮水平(P＜0.01～0.05).结论:血清一氧化氮的水平、结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子的表达与酒精性肝损伤的程度相平行且有密切关系;丹芪保肝汤通过降低一氧化氮水平,减轻内毒素血症,阻断细胞内结缔组织生长因子、肿瘤坏死因子表达,可能是该药物作用的重要分子机制之一. 目的:分析結締組織生長因子、腫瘤壞死因子和血清一氧化氮在慢性酒精性肝病大鼠的錶達狀況及丹芪保肝湯對慢性酒精性肝病的影響.方法:實驗于2004-04/11在中國醫科大學實驗動物部及中心實驗室完成.Wistar大鼠96隻,隨機分為3組:正常對照組(n=25),酒精性肝病模型組(n=38),丹芪保肝湯防治組(n=33).酒精性肝病模型組用梯度酒精定量灌胃的方法製備酒精性肝病模型,丹芪保肝湯防治組造模同時給予丹芪保肝湯口服;正常對照組動物給予相同容積的生理鹽水,于開始灌胃4、8、12週末分彆處死酒精性肝病模型組12、16、10隻大鼠,丹芪保肝湯防治組10、14、9隻及正常對照組動物9、8、8隻大鼠,下腔靜脈取血,經心髒灌流固定,取肝組織-70℃保存.分離血清,-20℃保存.取肝組織作囌木精-伊紅染色顯示變性、壞死狀況,免疫組化檢測肝內結締組織生長因子、腫瘤壞死因子錶達,採用硝痠還原酶法檢測血清一氧化氮含量.結果:各組實驗動物全部進入結果分析,如有因為起初嗆咳窒息和酒精的耐受性差的及時補充.①各組大鼠一般情況:酒精性肝病模型組大鼠同正常對照組相比,一般狀態差,毛色無光澤,易激惹,體質量減輕(P＜0.01),丹芪保肝湯防治組與酒精性肝病模型組體質量相比差異顯著(P＜0.01).②肝髒組織病理學改變光鏡下觀察結果:正常對照組肝細胞以中央靜脈為中心嚮外週呈放射狀分佈;酒精灌胃4週末,跼限性肝小葉中央靜脈區脂肪變性及空泡變性小于1/3,肝細胞點片狀壞死,炎細胞浸潤;8週末,肝小葉中央靜脈區脂肪及空泡變性明顯增多且小于2/3,肝細胞呈大片狀壞死;12週末,大于2/3肝小葉形成瀰漫性以大空泡變性為主的混閤性脂肪變,肝細胞壞死增多.③肝組織結締組織生長因子、腫瘤壞死因子免疫組化染色結果:酒精性肝病模型組、丹芪保肝湯防治組與正常對照組相比,肝髒結締組織生長因子的胞漿、腫瘤壞死因子的胞質的錶達均明顯增加(P＜0.01),酒精性肝病模型組與丹芪保肝湯防治組相比亦有顯著差異(P＜0.05);隨著乙醇刺激時間的延長和劑量的不斷加大,各酒精性肝病模型組及丹芪保肝湯防治組之間肝髒結締組織生長因子、腫瘤壞死因子的錶達也逐漸增加(P＜0.01).④各組大鼠血清一氧化氮水平:丹芪保肝湯防治組與酒精性肝病模型組血清一氧化氮水平在4週、8週、12週逐漸升高,各組內比較有統計學差異(P＜0.05);酒精性肝病模型組、丹芪保肝湯防治組分彆與正常對照組比較有統計學差異(P＜0.05).與酒精性肝病模型組相比,丹芪保肝湯防治組能有效抑製結締組織生長因子、腫瘤壞死因子錶達,降低血清一氧化氮水平(P＜0.01～0.05).結論:血清一氧化氮的水平、結締組織生長因子、腫瘤壞死因子的錶達與酒精性肝損傷的程度相平行且有密切關繫;丹芪保肝湯通過降低一氧化氮水平,減輕內毒素血癥,阻斷細胞內結締組織生長因子、腫瘤壞死因子錶達,可能是該藥物作用的重要分子機製之一.
목적:분석결체조직생장인자、종류배사인자화혈청일양화담재만성주정성간병대서적표체상황급단기보간탕대만성주정성간병적영향.방법:실험우2004-04/11재중국의과대학실험동물부급중심실험실완성.Wistar대서96지,수궤분위3조:정상대조조(n=25),주정성간병모형조(n=38),단기보간탕방치조(n=33).주정성간병모형조용제도주정정량관위적방법제비주정성간병모형,단기보간탕방치조조모동시급여단기보간탕구복;정상대조조동물급여상동용적적생리염수,우개시관위4、8、12주말분별처사주정성간병모형조12、16、10지대서,단기보간탕방치조10、14、9지급정상대조조동물9、8、8지대서,하강정맥취혈,경심장관류고정,취간조직-70℃보존.분리혈청,-20℃보존.취간조직작소목정-이홍염색현시변성、배사상황,면역조화검측간내결체조직생장인자、종류배사인자표체,채용초산환원매법검측혈청일양화담함량.결과:각조실험동물전부진입결과분석,여유인위기초창해질식화주정적내수성차적급시보충.①각조대서일반정황:주정성간병모형조대서동정상대조조상비,일반상태차,모색무광택,역격야,체질량감경(P＜0.01),단기보간탕방치조여주정성간병모형조체질량상비차이현저(P＜0.01).②간장조직병이학개변광경하관찰결과:정상대조조간세포이중앙정맥위중심향외주정방사상분포;주정관위4주말,국한성간소협중앙정맥구지방변성급공포변성소우1/3,간세포점편상배사,염세포침윤;8주말,간소협중앙정맥구지방급공포변성명현증다차소우2/3,간세포정대편상배사;12주말,대우2/3간소협형성미만성이대공포변성위주적혼합성지방변,간세포배사증다.③간조직결체조직생장인자、종류배사인자면역조화염색결과:주정성간병모형조、단기보간탕방치조여정상대조조상비,간장결체조직생장인자적포장、종류배사인자적포질적표체균명현증가(P＜0.01),주정성간병모형조여단기보간탕방치조상비역유현저차이(P＜0.05);수착을순자격시간적연장화제량적불단가대,각주정성간병모형조급단기보간탕방치조지간간장결체조직생장인자、종류배사인자적표체야축점증가(P＜0.01).④각조대서혈청일양화담수평:단기보간탕방치조여주정성간병모형조혈청일양화담수평재4주、8주、12주축점승고,각조내비교유통계학차이(P＜0.05);주정성간병모형조、단기보간탕방치조분별여정상대조조비교유통계학차이(P＜0.05).여주정성간병모형조상비,단기보간탕방치조능유효억제결체조직생장인자、종류배사인자표체,강저혈청일양화담수평(P＜0.01～0.05).결론:혈청일양화담적수평、결체조직생장인자、종류배사인자적표체여주정성간손상적정도상평행차유밀절관계;단기보간탕통과강저일양화담수평,감경내독소혈증,조단세포내결체조직생장인자、종류배사인자표체,가능시해약물작용적중요분자궤제지일.