CAJ | 학술논문

目的为在310基因分析仪上进行6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光STR复合扩增分型建立基础条件.方法以pGEM载体作为靶DNA,设计引物扩增获得500～80bp的13个长度不等DNA片段,以这些片段纯化物作为模板DNA,分别扩增获得6FAM、HEX、TMR和ROX标记的Matrix标准物,用4种Matrix标准物在310基因分析仪上构建可用于6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析的Matrix文件.结果扩增所得的13个非标记片段,长度分别为80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,在非变性聚丙烯酰胺凝胶连续电泳-银染凝胶上均表现为单条带,6FAM、HEX、TMR、ROX分别标记的片段通过310基因分析仪检测均为单峰.混合ROX标记的80、120、180、220、260、300bp的6个片段获得的内标,显示出良好的线性关系.结论建立了有效的6FAM-HEX-TMR-ROX四色荧光分析Matrix,为进行多个STR基因座荧光标记复合扩增检测奠定了基础.
목적 위재310기인분석의상진행6FAM-HEX-TMR-ROX사색형광STR복합확증분형건립기출조건.방법 이pGEM재체작위파DNA,설계인물확증획득500～80bp적13개장도불등DNA편단,이저사편단순화물작위모판DNA,분별확증획득6FAM、HEX、TMR화ROX표기적Matrix표준물,용4충Matrix표준물재310기인분석의상구건가용우6FAM-HEX-TMR-ROX사색형광분석적Matrix문건.결과 확증소득적13개비표기편단,장도분별위80、100、120、140、160、180、200、220、260、300、340、400、500bp,재비변성취병희선알응효련속전영-은염응효상균표현위단조대,6FAM、HEX、TMR、ROX분별표기적편단통과310기인분석의검측균위단봉.혼합ROX표기적80、120、180、220、260、300bp적6개편단획득적내표,현시출량호적선성관계.결론 건립료유효적6FAM-HEX-TMR-ROX사색형광분석Matrix,위진행다개STR기인좌형광표기복합확증검측전정료기출.