化工科技
化工科技
화공과기
SCIENCE & TECHNOLOGY IN CHEMICAL INDUSY
2006年
4期
16-20
,共5页
栾兴社%张长铠%黄俊%祝磊
欒興社%張長鎧%黃俊%祝磊
란흥사%장장개%황준%축뢰
葡萄糖基转移酶%节杆菌LF-Tou2%化学修饰%必需基团%结构基团
葡萄糖基轉移酶%節桿菌LF-Tou2%化學脩飾%必需基糰%結構基糰
포도당기전이매%절간균LF-Tou2%화학수식%필수기단%결구기단
节杆菌LF-Tou2葡萄糖基转移酶是控制絮凝剂聚糖合成的酶.通过对细胞超声破碎使酶释放,经Sephadex G200凝胶色谱和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱对酶进行了纯化.对酶学特性进行了分析,并用5种化学修饰剂对酶分子中5种不同氨基酸残基与催化活性之间的关系进行了研究.结果表明:该酶的分子质量为14315Da;样品中w(α-螺旋)=31.7%,w(β-转角)=34.1%,w(无规卷曲)=34.2%.Km为2.752μmol,Vmax为58.056μmol/min;Mn2+是酶活性强有力的激活剂,Fe2+次之.酪氨酸和二硫键是酶分子的结构基团,色氨酸、巯基和组氨酸是酶活力的必需基团,在必需基团中色氨酸最关键.
節桿菌LF-Tou2葡萄糖基轉移酶是控製絮凝劑聚糖閤成的酶.通過對細胞超聲破碎使酶釋放,經Sephadex G200凝膠色譜和DEAE-Sepharose Fast Flow離子交換色譜對酶進行瞭純化.對酶學特性進行瞭分析,併用5種化學脩飾劑對酶分子中5種不同氨基痠殘基與催化活性之間的關繫進行瞭研究.結果錶明:該酶的分子質量為14315Da;樣品中w(α-螺鏇)=31.7%,w(β-轉角)=34.1%,w(無規捲麯)=34.2%.Km為2.752μmol,Vmax為58.056μmol/min;Mn2+是酶活性彊有力的激活劑,Fe2+次之.酪氨痠和二硫鍵是酶分子的結構基糰,色氨痠、巰基和組氨痠是酶活力的必需基糰,在必需基糰中色氨痠最關鍵.
절간균LF-Tou2포도당기전이매시공제서응제취당합성적매.통과대세포초성파쇄사매석방,경Sephadex G200응효색보화DEAE-Sepharose Fast Flow리자교환색보대매진행료순화.대매학특성진행료분석,병용5충화학수식제대매분자중5충불동안기산잔기여최화활성지간적관계진행료연구.결과표명:해매적분자질량위14315Da;양품중w(α-라선)=31.7%,w(β-전각)=34.1%,w(무규권곡)=34.2%.Km위2.752μmol,Vmax위58.056μmol/min;Mn2+시매활성강유력적격활제,Fe2+차지.락안산화이류건시매분자적결구기단,색안산、구기화조안산시매활력적필수기단,재필수기단중색안산최관건.