分子植物育种
分子植物育種
분자식물육충
MOLECULAR PLANT BREEDING
2006年
5期
726-730
,共5页
刘立军%蒙祖庆%邢秀龙%彭定祥
劉立軍%矇祖慶%邢秀龍%彭定祥
류립군%몽조경%형수룡%팽정상
苎麻基因组%SRAP%扩增体系
苧痳基因組%SRAP%擴增體繫
저마기인조%SRAP%확증체계
以苎麻自交系品种为材料,研究了苎麻SRAP分析过程中的影响因素,包括10×PCR Buffer、模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于苎麻SRAP分析的PCR反应体系:即在20μl反应体系中,引物浓度为0.3μmol/L;模板DNA的用量为60~l00ng;Mg2+浓度为2.0mmol/L;dNTP浓度为0.2 mmol/L;Taq酶用量为1U.适宜的扩增程序为先94℃变性1min,前5个循环以94℃变性1min、33℃复性1min、72℃延伸1min进行,接下来将复性温度提高到52℃,其它条件不变,进行30个循环,最后72℃延伸5min,4℃保存.本文讨论了SRAP分子标记在苎麻上的应用前景,提出了应用SRAP分子标记构建苎麻遗传图谱的可行性.
以苧痳自交繫品種為材料,研究瞭苧痳SRAP分析過程中的影響因素,包括10×PCR Buffer、模闆濃度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循環次數、退火溫度等,建立瞭適于苧痳SRAP分析的PCR反應體繫:即在20μl反應體繫中,引物濃度為0.3μmol/L;模闆DNA的用量為60~l00ng;Mg2+濃度為2.0mmol/L;dNTP濃度為0.2 mmol/L;Taq酶用量為1U.適宜的擴增程序為先94℃變性1min,前5箇循環以94℃變性1min、33℃複性1min、72℃延伸1min進行,接下來將複性溫度提高到52℃,其它條件不變,進行30箇循環,最後72℃延伸5min,4℃保存.本文討論瞭SRAP分子標記在苧痳上的應用前景,提齣瞭應用SRAP分子標記構建苧痳遺傳圖譜的可行性.
이저마자교계품충위재료,연구료저마SRAP분석과정중적영향인소,포괄10×PCR Buffer、모판농도、Mg2+、dNTP、인물、Taq매、순배차수、퇴화온도등,건립료괄우저마SRAP분석적PCR반응체계:즉재20μl반응체계중,인물농도위0.3μmol/L;모판DNA적용량위60~l00ng;Mg2+농도위2.0mmol/L;dNTP농도위0.2 mmol/L;Taq매용량위1U.괄의적확증정서위선94℃변성1min,전5개순배이94℃변성1min、33℃복성1min、72℃연신1min진행,접하래장복성온도제고도52℃,기타조건불변,진행30개순배,최후72℃연신5min,4℃보존.본문토론료SRAP분자표기재저마상적응용전경,제출료응용SRAP분자표기구건저마유전도보적가행성.