生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2006年
3期
55-58
,共4页
高燕会%朱玉球%黄华宏%张雷凡%童再康
高燕會%硃玉毬%黃華宏%張雷凡%童再康
고연회%주옥구%황화굉%장뢰범%동재강
杨梅%RAPD%体系优化%正交设计
楊梅%RAPD%體繫優化%正交設計
양매%RAPD%체계우화%정교설계
以杨梅DNA为模板,对影响杨梅RAPD-PCR扩增的重要参数进行了优化试验,以期建立杨梅RAPD反应的最佳体系.通过采用正交试验设计的方法,对杨梅RAPD-PCR条件进行了优化,结果表明最佳的杨梅RAPD-PCR的反应体系(20μl)中含有1×buffer,1.0U TaqDNA聚合酶,3.0mmol/L MgCl2,0.30mmol/L dNTPs,1.5μmol/L引物和模板DNA 30-40ng.适宜的扩增条件为94℃预变性3min,再进入38个PCR循环(94℃变性30s,38℃退火30s,72℃延伸90s),72℃延伸7min,4℃保存.
以楊梅DNA為模闆,對影響楊梅RAPD-PCR擴增的重要參數進行瞭優化試驗,以期建立楊梅RAPD反應的最佳體繫.通過採用正交試驗設計的方法,對楊梅RAPD-PCR條件進行瞭優化,結果錶明最佳的楊梅RAPD-PCR的反應體繫(20μl)中含有1×buffer,1.0U TaqDNA聚閤酶,3.0mmol/L MgCl2,0.30mmol/L dNTPs,1.5μmol/L引物和模闆DNA 30-40ng.適宜的擴增條件為94℃預變性3min,再進入38箇PCR循環(94℃變性30s,38℃退火30s,72℃延伸90s),72℃延伸7min,4℃保存.
이양매DNA위모판,대영향양매RAPD-PCR확증적중요삼수진행료우화시험,이기건립양매RAPD반응적최가체계.통과채용정교시험설계적방법,대양매RAPD-PCR조건진행료우화,결과표명최가적양매RAPD-PCR적반응체계(20μl)중함유1×buffer,1.0U TaqDNA취합매,3.0mmol/L MgCl2,0.30mmol/L dNTPs,1.5μmol/L인물화모판DNA 30-40ng.괄의적확증조건위94℃예변성3min,재진입38개PCR순배(94℃변성30s,38℃퇴화30s,72℃연신90s),72℃연신7min,4℃보존.
