细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2006年
2期
141-143,147
,共4页
郄春花%秦波%黄爱龙%刘杞%陈国民
郄春花%秦波%黃愛龍%劉杞%陳國民
극춘화%진파%황애룡%류기%진국민
Hyper-IL-6%绿色荧光蛋白%真核细胞%表达
Hyper-IL-6%綠色熒光蛋白%真覈細胞%錶達
Hyper-IL-6%록색형광단백%진핵세포%표체
目的: 构建融合基因Hyper-IL-6并在真核细胞中进行表达.方法: 采用基因拼接(GeneSOEing)法将人类可溶性白细胞介素6受体和白细胞介素6的编码基因用一富含甘氨酸序列的接头经PCR扩增融合, 并定向克隆至pIRES2-EGFP, 构建与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的融合重组质粒, 转染哺乳动物细胞, 通过绿色荧光蛋白、 RT-PCR和免疫组化检测Hyper-IL-6蛋白的表达.结果: PCR扩增出1 224 bp的Hyper-IL-6编码序列并成功构建重组质粒pIRES-HIL-6, 重组质粒转染真核细胞后经检测证实Hyper-IL-6能在真核细胞中表达.结论: 人类Hyper-IL-6重组表达质粒的成功构建与真核表达为以后对其进行活性分析和生物学功能的研究提供了基础.
目的: 構建融閤基因Hyper-IL-6併在真覈細胞中進行錶達.方法: 採用基因拼接(GeneSOEing)法將人類可溶性白細胞介素6受體和白細胞介素6的編碼基因用一富含甘氨痠序列的接頭經PCR擴增融閤, 併定嚮剋隆至pIRES2-EGFP, 構建與綠色熒光蛋白(GFP)共錶達的融閤重組質粒, 轉染哺乳動物細胞, 通過綠色熒光蛋白、 RT-PCR和免疫組化檢測Hyper-IL-6蛋白的錶達.結果: PCR擴增齣1 224 bp的Hyper-IL-6編碼序列併成功構建重組質粒pIRES-HIL-6, 重組質粒轉染真覈細胞後經檢測證實Hyper-IL-6能在真覈細胞中錶達.結論: 人類Hyper-IL-6重組錶達質粒的成功構建與真覈錶達為以後對其進行活性分析和生物學功能的研究提供瞭基礎.
목적: 구건융합기인Hyper-IL-6병재진핵세포중진행표체.방법: 채용기인병접(GeneSOEing)법장인류가용성백세포개소6수체화백세포개소6적편마기인용일부함감안산서렬적접두경PCR확증융합, 병정향극륭지pIRES2-EGFP, 구건여록색형광단백(GFP)공표체적융합중조질립, 전염포유동물세포, 통과록색형광단백、 RT-PCR화면역조화검측Hyper-IL-6단백적표체.결과: PCR확증출1 224 bp적Hyper-IL-6편마서렬병성공구건중조질립pIRES-HIL-6, 중조질립전염진핵세포후경검측증실Hyper-IL-6능재진핵세포중표체.결론: 인류Hyper-IL-6중조표체질립적성공구건여진핵표체위이후대기진행활성분석화생물학공능적연구제공료기출.
