生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2005年
9期
857-864
,共8页
李敏%陈丽梅%林爱星%杨兴元%安晓荣%陈永福
李敏%陳麗梅%林愛星%楊興元%安曉榮%陳永福
리민%진려매%림애성%양흥원%안효영%진영복
Holstein牛%胚系基因%抗体%抗体重链恒定区μ基因(Cμ)%抗体重链可变区J基因(JH)%重组信号序列(RSS)
Holstein牛%胚繫基因%抗體%抗體重鏈恆定區μ基因(Cμ)%抗體重鏈可變區J基因(JH)%重組信號序列(RSS)
Holstein우%배계기인%항체%항체중련항정구μ기인(Cμ)%항체중련가변구J기인(JH)%중조신호서렬(RSS)
根据NCBI GenBankTM中登录的2个牛抗体重链可变区J基因(JH)(序列号为AY158087,AY149283)的序列不同之处设计PCR引物,能从同一个体的Holstein牛基因组DNA中扩增得到与以上2个基因分别相同的序列,证明这2个JH基因的差异不是由于牛个体或品种不同引起的.提取牛脾脏总RNA,RT-PCR扩增IgM cDNA,测序结果显示:序列号为AY149283的JH基因中第六外显子JH6是一个功能基因,它可以编码牛IgM的部分CDR3区和完整的FR4区,从2种IgM cDNA克隆的测序结果可以看出,其恒定区序列分别与序列号为U63637和AY230207的2种抗体重链恒定区μ基因(Cμ)cDNA序列相同.PCR扩增JH-Cμ序列,测序结果表明:序列号为AY158087的JH基因是同以上2种Cμ基因分别串连在一起的(序列号分别为AY230207和U63637).以上结果证明:序列号为U63637和AY230207的2个Cμ基因分别与AY149283的JH基因串联在一起,都能够参与牛IgM的产生,它们与AY158087的JH基因共同存在于同一个体Holstein牛胚系基因中.
根據NCBI GenBankTM中登錄的2箇牛抗體重鏈可變區J基因(JH)(序列號為AY158087,AY149283)的序列不同之處設計PCR引物,能從同一箇體的Holstein牛基因組DNA中擴增得到與以上2箇基因分彆相同的序列,證明這2箇JH基因的差異不是由于牛箇體或品種不同引起的.提取牛脾髒總RNA,RT-PCR擴增IgM cDNA,測序結果顯示:序列號為AY149283的JH基因中第六外顯子JH6是一箇功能基因,它可以編碼牛IgM的部分CDR3區和完整的FR4區,從2種IgM cDNA剋隆的測序結果可以看齣,其恆定區序列分彆與序列號為U63637和AY230207的2種抗體重鏈恆定區μ基因(Cμ)cDNA序列相同.PCR擴增JH-Cμ序列,測序結果錶明:序列號為AY158087的JH基因是同以上2種Cμ基因分彆串連在一起的(序列號分彆為AY230207和U63637).以上結果證明:序列號為U63637和AY230207的2箇Cμ基因分彆與AY149283的JH基因串聯在一起,都能夠參與牛IgM的產生,它們與AY158087的JH基因共同存在于同一箇體Holstein牛胚繫基因中.
근거NCBI GenBankTM중등록적2개우항체중련가변구J기인(JH)(서렬호위AY158087,AY149283)적서렬불동지처설계PCR인물,능종동일개체적Holstein우기인조DNA중확증득도여이상2개기인분별상동적서렬,증명저2개JH기인적차이불시유우우개체혹품충불동인기적.제취우비장총RNA,RT-PCR확증IgM cDNA,측서결과현시:서렬호위AY149283적JH기인중제륙외현자JH6시일개공능기인,타가이편마우IgM적부분CDR3구화완정적FR4구,종2충IgM cDNA극륭적측서결과가이간출,기항정구서렬분별여서렬호위U63637화AY230207적2충항체중련항정구μ기인(Cμ)cDNA서렬상동.PCR확증JH-Cμ서렬,측서결과표명:서렬호위AY158087적JH기인시동이상2충Cμ기인분별천련재일기적(서렬호분별위AY230207화U63637).이상결과증명:서렬호위U63637화AY230207적2개Cμ기인분별여AY149283적JH기인천련재일기,도능구삼여우IgM적산생,타문여AY158087적JH기인공동존재우동일개체Holstein우배계기인중.
