现代消化及介入诊疗
現代消化及介入診療
현대소화급개입진료
MODERN DIGESTION & INTERVENTION
2005年
3期
125-128
,共4页
朱惠明%王娜%蔡筱彦%邓传珍
硃惠明%王娜%蔡篠彥%鄧傳珍
주혜명%왕나%채소언%산전진
凋亡素%增强型绿色荧光蛋白%人结肠癌%细胞凋亡
凋亡素%增彊型綠色熒光蛋白%人結腸癌%細胞凋亡
조망소%증강형록색형광단백%인결장암%세포조망
目的探讨凋亡素基因的导入对人结肠癌细胞的影响.方法将凋亡素基因VP3克隆入真核表达载体pEGFP-C2,构建成重组质粒pEGFP-VP3.用脂质体转染法将pEGFP-C2和pEGFP-VP3分组分别转染人类结肠癌细胞(Lovo)和小鼠胚胎成纤维细胞(NIH3T3),通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在不同组细胞中的定位、表达及细胞的生长、凋亡情况,MTF法测定不同组细胞的生长曲线,并用An-nexin V-FITC流式细胞技术检测细胞的凋亡率.结果在Lovo/EGFP组和3T3/EGFP-VP3组细胞中,EGFP均匀分布于细胞中,细胞形态无明显变化,细胞凋亡率较非转染细胞组亦无明显增加.而在Lovo/EGFP-VP3组细胞中,EGFP-VP3以荧光颗粒形式集中在细胞核,并逐渐变粗,最后细胞碎裂成片状,流式细胞技术检测Lovo/EGFP-VP3组的细胞凋亡率明显高于其他对照组(P＜0.01).结论 pEGFP-VP3可诱导人类结肠癌细胞凋亡.
目的探討凋亡素基因的導入對人結腸癌細胞的影響.方法將凋亡素基因VP3剋隆入真覈錶達載體pEGFP-C2,構建成重組質粒pEGFP-VP3.用脂質體轉染法將pEGFP-C2和pEGFP-VP3分組分彆轉染人類結腸癌細胞(Lovo)和小鼠胚胎成纖維細胞(NIH3T3),通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白在不同組細胞中的定位、錶達及細胞的生長、凋亡情況,MTF法測定不同組細胞的生長麯線,併用An-nexin V-FITC流式細胞技術檢測細胞的凋亡率.結果在Lovo/EGFP組和3T3/EGFP-VP3組細胞中,EGFP均勻分佈于細胞中,細胞形態無明顯變化,細胞凋亡率較非轉染細胞組亦無明顯增加.而在Lovo/EGFP-VP3組細胞中,EGFP-VP3以熒光顆粒形式集中在細胞覈,併逐漸變粗,最後細胞碎裂成片狀,流式細胞技術檢測Lovo/EGFP-VP3組的細胞凋亡率明顯高于其他對照組(P＜0.01).結論 pEGFP-VP3可誘導人類結腸癌細胞凋亡.
목적탐토조망소기인적도입대인결장암세포적영향.방법장조망소기인VP3극륭입진핵표체재체pEGFP-C2,구건성중조질립pEGFP-VP3.용지질체전염법장pEGFP-C2화pEGFP-VP3분조분별전염인류결장암세포(Lovo)화소서배태성섬유세포(NIH3T3),통과형광현미경관찰록색형광단백재불동조세포중적정위、표체급세포적생장、조망정황,MTF법측정불동조세포적생장곡선,병용An-nexin V-FITC류식세포기술검측세포적조망솔.결과재Lovo/EGFP조화3T3/EGFP-VP3조세포중,EGFP균균분포우세포중,세포형태무명현변화,세포조망솔교비전염세포조역무명현증가.이재Lovo/EGFP-VP3조세포중,EGFP-VP3이형광과립형식집중재세포핵,병축점변조,최후세포쇄렬성편상,류식세포기술검측Lovo/EGFP-VP3조적세포조망솔명현고우기타대조조(P＜0.01).결론 pEGFP-VP3가유도인류결장암세포조망.
