中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2000年
6期
820-826
,共7页
万晶宏%罗凌%钱小红%郭尧君%邱宗荫%陆应麟%贺福初
萬晶宏%囉凌%錢小紅%郭堯君%邱宗蔭%陸應麟%賀福初
만정굉%라릉%전소홍%곽요군%구종음%륙응린%하복초
蛋白质组%二维电泳%固相pH梯度%图象分析
蛋白質組%二維電泳%固相pH梯度%圖象分析
단백질조%이유전영%고상pH제도%도상분석
为优化用于蛋白质组研究的二维电泳技术和计算机图象分析技术,以及初步分析比较与肿瘤细胞转移相关的蛋白质,以人肺巨细胞癌(PLA-801-D、C)高、低转移株作为研究对象,应用IPGphor进行第一向等电聚焦,随后,在Protein Ⅱ IPG conversion Kit上进行垂直SDS-PAGE的分离.利用光密度仪对银染的凝胶扫描,通过PDQuest软件进行蛋白斑点检测和配比.结果表明:(1)应用IPGphor,采用样品直接加入重泡胀溶液的形式,增大了溶解性,缩短聚焦时间、增大样品负荷量(分析型),提高了分辨率.(2)比较宽(pH=3～10L)、窄(pH=4～7L)范围IPG胶条,窄pH范围的IPG胶条具有较高的分辨率.(3)比较PLA-801-C、D细胞蛋白图谱之间的差异,其相关系数为0.7339±0.0291;仅在PLA-801-C株出现的蛋白为179个.
為優化用于蛋白質組研究的二維電泳技術和計算機圖象分析技術,以及初步分析比較與腫瘤細胞轉移相關的蛋白質,以人肺巨細胞癌(PLA-801-D、C)高、低轉移株作為研究對象,應用IPGphor進行第一嚮等電聚焦,隨後,在Protein Ⅱ IPG conversion Kit上進行垂直SDS-PAGE的分離.利用光密度儀對銀染的凝膠掃描,通過PDQuest軟件進行蛋白斑點檢測和配比.結果錶明:(1)應用IPGphor,採用樣品直接加入重泡脹溶液的形式,增大瞭溶解性,縮短聚焦時間、增大樣品負荷量(分析型),提高瞭分辨率.(2)比較寬(pH=3～10L)、窄(pH=4～7L)範圍IPG膠條,窄pH範圍的IPG膠條具有較高的分辨率.(3)比較PLA-801-C、D細胞蛋白圖譜之間的差異,其相關繫數為0.7339±0.0291;僅在PLA-801-C株齣現的蛋白為179箇.
위우화용우단백질조연구적이유전영기술화계산궤도상분석기술,이급초보분석비교여종류세포전이상관적단백질,이인폐거세포암(PLA-801-D、C)고、저전이주작위연구대상,응용IPGphor진행제일향등전취초,수후,재Protein Ⅱ IPG conversion Kit상진행수직SDS-PAGE적분리.이용광밀도의대은염적응효소묘,통과PDQuest연건진행단백반점검측화배비.결과표명:(1)응용IPGphor,채용양품직접가입중포창용액적형식,증대료용해성,축단취초시간、증대양품부하량(분석형),제고료분변솔.(2)비교관(pH=3～10L)、착(pH=4～7L)범위IPG효조,착pH범위적IPG효조구유교고적분변솔.(3)비교PLA-801-C、D세포단백도보지간적차이,기상관계수위0.7339±0.0291;부재PLA-801-C주출현적단백위179개.
